Что показывает онкомаркер BRAF V600, расшифровка анализа

Анализ мутаций в гене BRAF при меланоме для определения чувствительности к таргетным препаратам

Ген BRAF кодирует внутриклеточный белок, который является компонентом сигнальных каскадов RAS-MAPK и RAS-MEK-ERK, регулирующих пролиферацию клетки в ответ на внешние митогенные стимулы. Белок BRAF имеет киназную активность которая необходима для передачи сигнала при его активации. Соматические активирующие мутации BRAF часто встречаются при меланоме кожи, опухолях щитовидной железы, paке яичников, paке толстой и прямой кишки.
Наиболее частой активирующей мутацией гена BRAF является точечная нуклеотидная замена c.1799T>A которая соответствует мутации V600E в белке BRAF. При меланоме кожи мутация V600E составляет 80-90% мутаций BRAF; кроме этой мутации встречаются V600K (10-20%), V600R, V600D, V600E2 и другие редкие мутации.

Что такое Вемурафениб, Дабрафениб и Траметиниб

Препараты Зелбораф/Вемурафениб (Zelboraf/vemurafenib) (Roche), и Тафинлар/ Дабрафениб (Tafinlar/ dabrafenib) (GlaxoSmithKline) являются ингибиторами киназной активности BRAF. Эти ингибиторы селективно подавляют киназную активность белка BRAF с мутациями в положении V600 по сравнению с белком без мутаций. Клинические испытания показали высокую эффективность препаратов Вемурафениб и Дабрафениб для химиотерапии метастатической меланомы кожи с мутациями V600E или V600K. В ЕЭС Европейским медицинским агенством (ЕМА) разрешено применение Вемурафениба и Дабрафениба для химиотерапии метастатической меланомы с мутацией BRAF-V600. В США Управление по надзору за качеством пищевых продуктов и лекарственных средств (FDA) разрешило применение этих препаратов для лечения пациентов с метастатической меланомой с мутацией BRAF-V600E. Кроме меланомы кожи клинические исследования показали активность Вемурафениба и Дабрафениба и при других солидных опухолях с мутацией BRAF-V600E (paке щитовидной железы, немелкоклеточном paке легких).

Кому рекомендуется BRAF-тест

Тест на мутации гена BRAF рекомендуется пациентам с меланомой кожи, опухолях щитовидной железы, paком яичников, paком толстой и прямой кишки для оценки возможности терапии препаратами Вемурафениб и Дабрафениб.

Какие мутации в гене BRAF являются показанием к применению препаратов Вемурафениб и Дабрафениб

Мутация BRAF V600E при метастатической меланоме кожи является показанием к применению препаратов Вемурафениб и Дабрафениб в США. В ЕЭС показания к применению не ограничиваются мутацией V600E, а включают и более редкие мутации в положении V600. В клинических испытаниях мутация BRAF V600E коррелирует с наиболее высокой чувствительностью меланомы кожи к лечению препаратами Вемурафениб и Дабрафениб. Кроме мутации V600E доклинические и клинические исследования показали активность этих препаратов на клетках несущих мутации BRAF V600K, V600R, V600D и другие редкие мутации в положении V600.

Какие методы применяются в лаборатории генодиагностики БиоЛинк для BRAF теста

В лаборатории генодиагностики «БиоЛинк» используется метод аллель-специфической ПЦР в режиме реального времени с целью выявления мутации V600E/K/E2/D в гене BRAF. Чувствительность теста позволяет выявить наличие 1% мутантной ДНК BRAF в опухоли, что значительно выше чувствительности прямого секвенирования ДНК.

Материалы для исследования

В качестве материала для анализа может использоваться ДНК опухолей, выделенная из свежезамороженной ткани или ткани фиксированной формалином и заключенной в парафин.

Популярное видео

Мутация гена BRAF при меланоме

Частота и виды мутаций в гене BRAF

Частота мутаций в гене BRAF при меланоме кожи, по данным разных исследователей, варьирует от 30-40% до 70%. Наиболее распространенной (69-94% случаев) разновидностью BRAF-мутаций является V600E – замена валина на глутамин в 600-м кодоне. Эта мутация представляется доминирующей, но далеко не единственной разновидностью нарушений BRAF [14, 15]. Второй по частоте является мутация V600К – ее частота может достигать 5-10%. Мутации V600D и V600R встречаются значительно реже.

Cтатус мутации гена BRAF и выбор тактики лечения

За последние годы достигнуты значительные успехи в изучении патогенетических основ развития меланомы и сделан огромный шаг к выявлению новых потенциальных молекулярных мишеней. Открытие молекулярной мишени BRAF и понимание ее роли в патогенезе меланомы легли в основу разработки нового класса препаратов – низкомолекулярных ингибиторов мутированного фермента BRAF. Использование этих препаратов позволяет блокировать патологически активированный сигнальный каскад, который запускается мутацией BRAF V600, и, таким образом, тормозить развитие опухоли. Следует особо отметить, что воздействие данной группы препаратов на опухолевые клетки с нормальной последовательностью BRAF, напротив, может сопровождаться патологической активацией каскада RAS-RAF-MEK-ERK и провоцировать рост меланомы. Этот феномен свидетельствует об исключительной важности достоверной диагностики статуса гена BRAF.

BRAF ингибиторы не должны использоваться в тех случаях, когда статус мутации BRAF не определен или мутация не обнаружена!

Следует подчеркнуть, что ингибиторы BRAF и MEK зарегистрированы к применению только для терапии метастатической формы меланомы. В настоящее время отсутствуют данные по использованию ингибиторов BRAF и MEK в адъювантном режиме, поэтому они не могут быть рекомендованы пациентам, перенесшим (условно-)радикальное удаление первичной меланомы и метастических очагов.

В рандомизированных клинических исследованиях ингибиторы BRAF – вемурафениб и дабрафениб – продемонстрировали значительное преимущество по сравнению со стандартной химиотерапией в отношении частоты объективных ответов, продолжительности жизни без прогрессирования и общей продолжительности жизни у пациентов с метастатической меланомой и подтвержденной мутацией гена BRAF, ранее не получавших системного лечения (см. рис. 2). Полученные результаты привели к пересмотру международных клинических рекомендаций, которые включили эти препараты в современные стандарты лечения метастатической меланомы кожи с BRAF мутацией.

Читать еще:  Дерматофиброма – внутрикожная опухоль

Результаты последних исследований показали, что двойное ингибирование сигнального пути MAРK, которое достигается при одновременном использовании ингибиторов BRAF и MEK, обладает более высокой эффективностью по сравнению с ингибитором BRAF в монорежиме. Важно отметить, что помимо более высокой эффективности комбинация препаратов снижает вероятность развития резистентности к проводимой терапии и отдельных нежелательных явлений, в том числе плоскоклеточного paка кожи. В рамках клинического исследования coBRIM было подтверждено, что комбинированная терапия с использованием препаратов вемурафениб и кобиметиниб в 90% случаев позволяет достичь ответа на терапию у больных BRAF+ метастатической меланомой. У каждого второго пациента более года отсутствовали признаки прогрессирования заболевания, а общая выживаемость приближалась к 2 годам (рис. 3).

Сходные результаты были продемонстрированы в исследованиях дабрафениба и траметиниба. В частности, исследование COMBI-V (дабрафениб+траметиниб vs монотерапия вемурафенибом) продемонстрировало значимой увеличение общей продолжительности жизни у пациентов, получавших комбинированную терапию, по сравнению с применением вемурафениба без ингибитора MEK (25.6 мес. vs 18 мес.; рис. 4, табл. 1). В клиническом испытании COMBI-D сравнивалась эффективность комбинации дабрафениб+траметиниб по отношению к монотерапии дабрафенибом в сочетании с плацебо. Примечательно, что в этом исследовании были зарегистрированы пpaктические идентичные показатели общей продолжительности жизни (25.1 мес. vs 18.7 мес.; рис. 5, табл. 1).

Определение статуса гена BRAF является обязательным компонентом выработки тактики лечения всех пациентов с неоперабельной/метастатической меланомой кожи.

Рисунок 2. Результаты рандомизированного исследования BRIM-3: сравнение эффективности вемурафениба и дабрафениба в 1-й линии терапии метастатической меланомы с мутацией BRAF.

Рисунок 3. Результаты рандомизированного исследования coBRIM: сравнение эффективности комбинации кобиметиниба+вемурафениба и вемурафениба+плацебо в 1-й линии терапии метастатической меланомы с мутацией BRAF.

Рисунок 4. Результаты клинического исследования COMBI-V: (дабрафениб+траметиниб vs монотерапия вемурафенибом).

Рисунок 5. Результаты клинического испытания COMBI-D: эффективность комбинации дабрафениб+траметиниб по отношению к монотерапии дабрафенибом в сочетании с плацебо.

Сводные данные по всем исследованиям представлены в таблице 1.

Онкомаркеры — норма, можно ли не бояться paка?

Онкомаркеры являются методом современной диагностики, которые используются в постановке диагноза oнкoлoгического заболевания.

Существует целый ряд онкоспецифичных белков, антигенов и веществ (например, онкомаркер АФП), которые могут быть ассоциированы со злокачественными опухолями. При этом может быть такая ситуация, когда онкомаркеры находятся в диапазоне значений норма, но болезнь в результате будет обнаружена.

Иными словами, на ранних стадиях oнкoлoгического заболевания только некоторые из специфичных для paка показателей могут иметь повышенные значения, причем к их повышению часто приводит целый ряд и других причин.

На что стоит обратить внимание при сдаче тестов на paк

Онкомаркеры для диагностики применяются только в совокупности с другими клиническими данными и большей частью для предварительного скрининга заболевания или мониторинга лечение.

Повышение показателя может быть вызвано определенным физиологическим состоянием. Что, например, хаpaктерно для специфичных белков злокачественного поражения яичников и молочной железы, повышающихся в период критических дней.

Очень важно при подготовке к анализу онкомаркеров соблюдать все необходимые рекомендации, которые опубликованы на сайтах лабораторий, предлагающих услуги. Выполнение рекомендаций поможет получить доверительный результат.

Если вы хотите подробно узнать профессиональную информацию на тему «онкомаркеры и онкоспецифичные вещества – что это?», посмотрите описание онкоспецифичных белков в любой интернациональной лаборатории в вашем городе. В разделе цен на анализы приведены названия, особенности подготовки к анализу и точное медицинское описание, которое позволяет составить точное представление о назначенном тесте.

Понятие онкомаркера и его особенности

Показатели большинства онкомаркеров используются в современной медицине для диагностики oнкoлoгических заболеваний.

В большинстве случаев они представляют собой определенную белковую структуру, вещество или антиген, их повышенное содержание в исследуемом образце пациента может говорить о наличии злокачественного процесса. Между тем это не всегда так.

Например, часто используемый в обследованиях маркер paково-эмбрионального белка (РЭА) может повышаться и при доброкачественном изменении клеток.

Онкормаркер са – 125, который применяется для оценки опухоли яичника, поднимается в период критических дней и при некоторых репродуктивных патологиях. В качестве онкомаркера метастаз часто используется костная фосфатаза, при этом данный анализ делает только ограниченное количество лабораторий, а повышение щелочной фосфатазы может быть вызвано как с поражением органов ЖКТ, так и, например, беременностью.

Как правило, сильно повышенные онкомаркеры в человеческой крови хаpaктерны для выраженных стадий paка. На первой и второй стадии часто наблюдаются нормативные данные.

В некоторых случаях маркеры могут не подниматься, поэтому для оценки рисков наличия онкозаболевания в процессе обследования используется несколько специфичных белков и веществ, анализ содержания в образце пациента которых даст более точную картину и оценку риска.

Онкомаркеры как относительные показатели рисков paка

Иными словами – онкомаркеры являются относительными показателями оценки вероятности oнкoлoгического заболевания.

Окончательный диагноз может быть поставлен после проведения КТ, МРТ, биопсии или взятия гистологии с образца ткани.

Обратите внимание, что очень важна точная диагностика заболевания, чтобы провести правильное планирование хирургического вмешательства. Как повышенный, так и нормальный результат при сдаче крови на онкомаркеры не даст точный ответ о наличии oнкoлoгии. При этом специфичные белки используются часто для отслеживания динамики противоопухолевого лечения.

Читать еще:  Доксициклин показания к применению в гинекологии

Где сдать онкомаркеры и узнать данные о норме?

Нормы многих онкомаркеров зависят от метода и тест-системы, используемой в выбранной вами лаборатории. Информация о диапазоне значений онкомаркеров будет содержаться в результатах анализа, которые выдадут пациенту в лаборатории. Обычно диапазоны значений указываются в соседнем столбце, рядом с результатом пациента.

При завышенных показателях графа дополнительно выделяется специальной отметкой.

Если вы используете значение выбранных онкомаркеров в качестве оценочных данных собственного состояния здоровья, для точности лучше сдавать анализы при использовании одних и тех же методов и тест-систем.

Референсные данные онкомаркеров можно получить в лаборатории непосредственно или на официальном сайте.

Нормативные и повышенные значения онкомаркеров

В нашем обзоре приводятся нормативные результаты некоторых онкомаркеров, а также тест-системы, которые обычно используются для проведения оценки. Обращаем еще раз внимание, что как нормативные, так и повышенные показатели не позволяют сделать точные выводы о наличии или отсутствии oнкoлoгического заболевания.

Онкомаркеры для определения типа опухолей, и что это такое лучше уяснить на примерах. Какие показатели стоит определить в каждом определенном случае, нужно узнать у врача.

Онкомаркер эпителиального paка яичника HE4 (тест-система ARCHITECT)

1. пременопауза: меньше 70 пмоль/л, меньше 7,4%;
2. постменопауза: меньше 140 пмоль/л, меньше 7,4%.

Онкомаркер используется для уточнения хаpaктера новообразований в придатках матки перед хирургической операцией.

HE4 применяется только для оценки вероятности, но не точной постановки диагноза. Причем нормальный уровень HE4 также может быть хаpaктерен для женщин с oнкoлoгическим поражением эпителия, это связано с тем, что некоторые виды oнкoлoгических новообразований яичников редко выделяют этот белок, но имеет место при герминогенных и мукоидных опухолях.

Также имеются данные о повышении данного белка у не больных женщин, а также у больных другими типами опухолей (ЖКТ, гpyди, эндометрия и др.).

Углеводный антиген СА 72-4: для оценки вероятности paка органов ЖКТ и других опухолей

Нормативные значения:

Нормативные значения: 0,90 — 6,67 ед/мл (мужчины и небеременные женщины).

Онкомаркер АФП применяется как тестовое значение, оценивающее уровень сывороточного эмбрионального белка, который выpaбатывается в эмбриональный период.

У взрослых людей и небеременных женщин значение постоянно и значительно меньше, чем у детей грудного возраста и беременных.

Рост альфафетопротеина может наблюдаться при злокачественных образованиях и наблюдается при paке печени. Также его повышение может иметь место при доброкачественных новообразованиях.

Раково-эмбриональный антиген

Обращаем ваше внимание, что для определения заболевания онкомаркеров расшифровка может делаться только квалифицированным терапевтом или oнкoлoгом.

Для постановки диагноза используется целый ряд относительных и абсолютных показателей, а также методы качественной оценки новообразований, например, КТ и МРТ. Для первичной оценки риска заболевания можно использовать и обычный общий и расширенный анализ крови.

Злокачественный процесс, как правило, способствует значительному повышению фибриногена и СОЭ. Повышение щелочной фосфатазы при наличии опухолевого процесса может свидетельствовать о метастазах, при этом данный показатель является относительным, так как вещество выполняет защитную роль для органов ЖКТ и повышается при ряде соматических заболеваний.

Для комплексной оценки oнкoлoгического риска используются наборы онкомаркеров, представленные в виде oнкoлoгических панелей. О методах комплексной оценки можно узнать на сайте выбранной лаборатории.

Учитывайте, что список онкоспецифичных тестов гораздо шире. Отдельные лаборатории предлагают отправку анализов Японию или Германию. В России также имеется несколько высокотехнологичных лабораторий, которые могут сделать точную оценку вероятности заболевания.

Точность анализа определяется используемой тест-системой, поставляемой крупнейшими медицинскими производителями. Для получения точного результата мониторинга онкомаркера требуется совпадение метода оценки.

Что показывает онкомаркер BRAF V600, расшифровка анализа

В настоящее время мутация гена BRAF — V600, используется в диагностике меланомы, paка толстого кишечника, paка прямой кишки, но в ближайшем будущем показания для этого теста будут расширены.
Исследуемый материал — ткань опухоли, тест применяется для выбора таргетированной терапии.

Определение мутаций гена BRAF имеет исключительно важное значение для прогноза болезни и лечения для многих видов paка.

Если тест на мутацию гена BRAF положительный, это означает, что V600 мутация найдена.

Интерпретация теста при меланоме

Расшифровка анализа онкомаркера BRAF V600 показывает, что примерно 40-60% кожных меланом имеют разные мутации BRAF. В 90% случаев эти генетические поломки определяются тестом V600.
Существует лекарство — ингибитор (vemurafenib), которое способно подавить мутирование — то есть обладает противоопухолевым эффектом для клеток меланомы, в которых обнаружена мутация V600.
Поэтому для лечения меланомы крайне важно выполнить этот тест.

Рак кишечника

Определение Онкомаркера BRAF V600 при колоректальном paке необходимо, чтобы отличить наследственный неполипозный paк — колоректальную карциному (HNPCC) от спорадического колоректального paка.
Разграничение этих двух заболеваний имеет важное значение. Дополнительно выполняют тест на онкомаркер MSI-H. Пациенты с наследственным неполипозным paком и члeны их семьи должны пройти расширенное генетическое тестирование. Так как при данной семейной форме paка кишечника возможны повторные опухоли органов, и таким людям может быть предложена операция в профилактических целях.

Читать еще:  Допустимо ли удалять висячие родинки в домашних условиях

Выявление микросателитной нестабильности (MSI) — важный фактор в понимании механизма колоректального неполипозного наследственного paка. Полная расшифровка генома — дорогое удовольствие, поэтому генетическое тестирование может быть предложено только выборочно. Пациенты могут быть отобраны с помощью предварительного теста BRAF V600
Наличие мутации BRAF означает, что опухоль нечувствительна к некоторым лекарствам — ингибиторам эпидермального клеточного роста (EGFR). Иногда для уточнения назначают исследование онкомаркера k-ras для подтверждения устойчивости опухоли к анти-EGFR лекарствам.
Определение онкомаркера используют и для прогноза болезни, положительный тест связан с худшим прогнозом.

Рак щитовидной железы

Расшифровка онкомаркера BRAF при опухоли щитовидной железы:

• Наличие мутации ассоциируется с худшим прогнозом и метастазами

Определение онкомаркера BRAF V600 выполняют и при других видах paка :
Для дифференциального диагноза некоторых форм лейкемии, лимфомы, опухолей легкого, глиомы, печени, желудка, пищевода.

Материал для исследования

Онкомаркер определяют в ткани опухоли. Материал для исследования должен быть доставлен в лабораторию в свежем или замороженном состоянии или в формалине, парафине.
Чаще всего применяют технику определения — реакцию полимеризации в реальном времени, реже различные модификации определения ДНК

Есть ли норма у этого теста

Понятие нормы неуместно, когда мутацию определяют в опухоли. Болезнь уже есть и наличие или отсутствие мутации просто говорит о разных типах опухолей.
В норме данный онкоген принимает участие в контроле за размножением клеток, их ростом и дифференцировкой.
Мутация гена приводит к тому, что эти процессы оказываются бесконтрольными.
Ученые обнаруживает до 30 разных мутаций гена, но тест V600 позволяет определить 90% всех возможных патологических изменений гена.
Поломка гена выявляется в 27-70% меланом, в 5-22% колоректального paка, в 36-53% папиллярного paка щитовидной железы, 30% paка яичников и реже в опухолях другой локализации.

Теперь, когда мы подробно разобрали, что показывает онкомаркер BRAF V600, поясним, когда этот тест полезен.

• позволяет отличить папиллярный paк щитовидной железы от других видов злокачественных опухолей щитовидной железы и доброкачественных узловых образований щитовидной железы;
• спорадический paк толстой кишки от наследственного неполипозного колоректального paка (HNPCC) ;
• волосатоклеточный лейкоз от других В-клеточных лимфом с аналогичными клиническими и морфологическими особенностями;
• позволяет определить прогноз болезни: paковые заболевания с мутацией BRAF оказываются более агрессивны, чем paк без мутации, в случаях папиллярного paка щитовидной железы и колоректального paка;
• помогает в принятии решений о лечении, потому что у больных с распространенным колоректальным paком и положительным тестом на BRAF мутацию, вероятна устойчивость к ингибиторам эпидермального фактора роста (цетуксимабу и панитумумабу) ;
• целесообразно для целей таргетированной терапии, так как присутствие мутантного BRAF является ценной терапевтической мишенью, особенно в случае метастатической меланомы.

Исследования в отношении полезности обнаружения онкомаркера BRAF продолжаются. Тем не менее, в настоящее время, тестирование на BRAF мутацию широко используется только для таргетированной терапии распространенной злокачественной меланомы. Как будет собрано больше доказательств, определение онкомаркера BRAF мутации может стать стандартом в лечении в диагностике других видов злокачественных заболеваний.

Анализы на мутацию гена BRAF V600E/K?

Регистрация: 06.09.2011 Сообщений: 3

Анализы на мутацию гена BRAF V600E/K?

Игорь Евгеньевич, пожалуйста, подскажите где в Москве можно проверить клетки меланомы на мутацию гена BRAF V600E/K?
Сколько по времени занимает этот анализ? Обязательно ли присутствие
больного для взятия крови или можно обойтись одними стеклами?

Звонили в несколько крупных лабораторий — не делают. говорят что определяют только в научно-исследовательских целях. Так ли это?

Регистрация: 07.10.2005 Сообщений: 2,566

Отдел патоморфологии РОНЦ ( www.ronc.ru) , Строганова Анна Михайловна, анализ выполняется по блокам, а не по стеклам или крови.

Регистрация: 06.09.2011 Сообщений: 3

Спасибо Вам за ответ!
К сожалению, пока не смогли дозвониться в РОНЦ.

А возможно ли провести этот анализ по парафиновым блокам но не с гистологическим, а с цитологическим материалом (пункция лимфоузла)?

Регистрация: 07.10.2005 Сообщений: 2,566

Парафиновые блоки не изготавливаются из пунктата.

Регистрация: 06.09.2011 Сообщений: 3

Мужу изготовили такие блоки когда он находился на обследовании в Израиле.

Сейчас это все, что осталось у него на руках.

Т.есть получается, что для этого анализа у нас нет материала?

Регистрация: 07.10.2005 Сообщений: 2,566

Нет, если есть парафиновые блоки, то материал для анализа есть. Вероятно, в Израиле выполнили кор-биопсию (толстоигольную биопсию), это не совсем то, что у нас называют пункцией, но внешне похоже.

• Сейчас на форуме
• Присутствуют: 0 пользователей и 159 гостей
• Рекорд одновременного пребывания 2,457, это было 14.09.2019 в 18:58.
• Все Пользователи не на сайте
• Статистика
• Тем: 22,643 I Сообщений: 196,307 I Пользователи: 57,398 I Лучший автор: А.В. Филипцов (7,756)
• Приветствуем нового пользователя, mixaal

Oncoforum.ru – информационная площадка «Всё о paке»

На сайте представлена обширная подборка материалов по oнкoлoгическим заболеваниям, их диагностике, лечению и профилактике, изложенная в доступной для читателей форме. Самая актуальная и проверенная информация — новости мировой oнкoлoгии о новых препаратах, методах лечения и ранней диагностики paка.