Если отправка будет осуществляться через почтовые сервисы, то запечатайте все конверты в один большой конверт. Не забудьте приложить бланк заказа.

Инструкция по сбору биоматериала

4.2. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ. БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ

Техника сбора и трaнcпортирования биоматериалов в микробиологические
лаборатории

Дата введения 2006-07-01

1. РАЗРАБОТАНЫ: МОНИКИ им. М.Ф.Владимирского (К.И.Савицкая, Е.Е.Круглов) ; Главным бактериологом Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (В.В.Кутырев) ; Центральным научно-исследовательским институтом эпидемиологии (Н.А.Семина, В.В.Галкин) ; ФГУЗ «Федеральный центр гигиены и эпидемиологии» Роспотребнадзора (Е.Н.Беляев, И.В.Брагина, Н.С.Кривопалова) ; Научно-исследовательским институтом антимикробной химиотерапии Смоленской государственной медицинской академии (Л.С.Страчунский, Р.С.Козлов) ; Научно-исследовательским институтом вирусологии им. Д.И.Ивановского (Л.В.Урываев) ; Институтом медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского ММА им. И.М.Сеченова (В.П.Сергиев, М.Н.Лебедева) ; Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (З.С.Середа).

2. РЕКОМЕНДОВАНЫ К УТВЕРЖДЕНИЮ Комиссией по государственному санитарно-гигиеническому нормированию при Федеральной службе по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека 6 октября 2005 г. (протокол N 3).

3. УТВЕРЖДЕНЫ И ВВЕДЕНЫ В ДЕЙСТВИЕ Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 23 декабря 2005 г.

4. ВВЕДЕНЫ В ДЕЙСТВИЕ с 1 июля 2006 г.

5. ВВЕДЕНЫ ВПЕРВЫЕ.

1. Область применения

1. Область применения

1.1. В методических указаниях изложены правила сбора и трaнcпортирования биологических материалов в микробиологические лаборатории в целях повышения качества результатов лабораторных исследований и организации противоэпидемических и профилактических мероприятий, а также профилактики внутрибольничных инфекций у медицинского персонала и пациентов.

1.2. Методические указания предназначены для использования органами и организациями Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут использоваться органами и организациями здравоохранения.

2. Общие положения

2.1. Получение достоверных данных о выявлении источников заражения необходимо для своевременной и эффективной организации противоэпидемических и профилактических мероприятий, оценки уровня пораженности населения при проведении эпидемиологического надзора.

2.2. Разработанная техника сбора и трaнcпортирования биологических материалов в микробиологические лаборатории позволит снизить уровень преаналитической ошибки и повысить качество работы лабораторий по объективизации результатов.

2.3. Методические указания определяют правила пpeдoxpaнения медицинского персонала и пациентов от инфицирования при сборе и доставке в лаборатории проб биоматериалов, которые могут быть обсеменены бактериями, грибами, вирусами, паразитами.

2.4. Методические указания могут применяться при проведении эпидемиологического надзора за антимикробной резистентностью выделенных и идентифицированных в лаборатории возбудителей инфекции, оптимизации применения антимикробных препаратов и мероприятий в области профилактики, контроля и сдерживания резистентности на локальном, региональном и национальном уровнях.

3. Общие требования к сбору проб биологического материала для микробиологического исследования

3.1. Для пpeдoxpaнения от инфицирования медицинского персонала и пациентов при сборе проб биоматериалов и доставке его в лабораторию необходимо:

не загрязнять наружную поверхность посуды при сборе и доставке проб;

не загрязнять сопроводительные документы (направления) ;

свести к минимуму непосредственный контакт пробы биоматериала с руками медицинского работника, собирающего и доставляющего его в лабораторию;

использовать стерильные одноразовые или разрешенные к применению для этих целей в установленном порядке контейнеры (емкости) для сбора, хранения и доставки проб;

трaнcпортировать пробы в переносках или укладках с раздельными гнездами;

соблюдать асептические условия для предотвращения инфицирования пациента в процессе выполнения инвазивных мероприятий;

собирать пробы в стерильную одноразовую или стеклянную посуду (не загрязненную биоматериалом, не испорченную трещинами, отколотыми краями и другими дефектами)

3.2. Пробы биоматериала необходимо собирать следующим образом:

до начала антибактериальной терапии, при отсутствии такой возможности — непосредственно перед повторным введением (приемом) препаратов;

в количестве (вес, объем), необходимом для выполнения анализа, т.к. недостаточное для исследования количество биоматериала приводит к получению ложных результатов;

с минимальным загрязнением материала нормальной микрофлорой, т.к. ее наличие приводит к ошибочной тpaктовке результатов, полученных, например, при исследовании мокроты, проб из носа, глотки (зева), гeнитaлий и др.

3.3. При сборе пробы следят за тем, чтобы в лаборатории при вскрытии емкости с биоматериалом не образовывался аэрозоль: пробы крови и других жидкостей организма аккуратно без образования пены переносят из шприца в сухую и/или наполненную средой (антикоагулянтом) посуду.

3.4. В направлении на исследование указывают: фамилию, имя, отчество больного; год рождения; отделение, в котором он находится; номер истории болезни (амбулаторной карты) ; диагноз; материал, посылаемый на исследование, и задачи исследования; дату и время взятия материала (часы) ; антибактериальные (иммунные) препараты, если проба сдается на фоне антибиотико- и/или иммунотерапии; фамилию, имя, отчество лечащего врача (консультанта), направляющего пробу на исследование. При направлении биоматериалов, полученных при вскрытии, указывают также отделение, в котором умер больной.

3.5. Перед сбором пробы, особенно при применении инвазивных методов, учитывается вероятность риска для пациента и пользы, а также значимость именно данного вида биоматериала для целей объективизации клинического диагноза и оценки проводимых или планируемых лечебных мероприятий.

4. Общие требования к доставке проб биоматериала в микробиологическую лабораторию

4.1. Все собранные пробы отправляют в микробиологическую лабораторию немедленно после получения, за исключением случаев использования емкостей с трaнcпортировочными средами, разрешенными к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке.

Это необходимо для:

сохранения жизнеспособности возбудителей и возможности выделения микроорганизмов, требующих особых условий культивирования (Haemophylus и др.) ;

предотвращения избыточного роста быстрорастущих и активных микроорганизмов;

поддержания соотношения исходных концентраций изолятов при наличии в пробе микробных ассоциаций;

сокращения времени контакта пробы с некоторыми антисептиками, используемыми местно, которые могут обладать антибактериальной активностью;

объективизации клинического диагноза инфекционно-воспалительного заболевания и оценки результатов терапии.

4.2. Допускается использование альтернативных методов для увеличения сроков доставки биоматериала в лабораторию.

Пробы хранят в холодильнике при температуре 2-8 °С, за исключением нижеперечисленных случаев.

4.2.1. Когда пробу хранят в специализированной трaнcпортировочной емкости (трaнcпортировочная система), разрешенной к применению в установленном порядке, представляющей собой стерильную одноразовую пробирку с агаризованной или жидкой трaнcпортировочной средой и зондом-тампоном, вмонтированным в пробку и стерильно упакованным вместе с пробиркой. В таких емкостях пробы хранят при комнатной температуре (18-20 °С). Транспортировочные среды, специальные плотные с активированным углем и без него, позволяют обеспечить сохранение жизнеспособности микроорганизмов, требующих особых условий культивирования, в течение 48-72 ч.

Для проб на анаэробы и для фекальной флоры используют специальные емкости с трaнcпортировочной средой, пробирки со средами для выделения кампилобактерий и хеликобактера, разрешенные к применению в установленном порядке. Такие среды создают анабиотическую атмосферу для микроорганизмов, что способствует снижению их метаболизма, сдерживанию роста, препятствует их высыханию и накоплению продуктов жизнедеятельности.

Каждую пробу, собранную в жидкую среду, тщательно перемешивают со средой.

4.2.2. Когда кровь культивируют в бульоне, тогда после получения пробу хранят в термостате при температуре 35-37 °С.

Если пробы собирают в специальные емкости для последующего исследования с двухфазной средой, их следует хранить при комнатной температуре (18-20 °С).

4.2.3. Когда при возможном наличии температурозависимых микроорганизмов (Neisseria sp.) пробы оставляют при комнатной температуре (18-20 °С).

4.2.4. Когда пробу хранят в емкостях с соответствующими питательными средами, подготовленных в лаборатории или разрешенных к применению в установленном порядке при проведении:

бактериологических исследований — в пробирках с вмонтированными зондами-тампонами или без них со средой, состоящей из забуференного физиологического раствора с глицерином для определения энтеробактерий семейства Кишечных («на дизгруппу») и аэромонад. При работе с тампонами, вмонтированными в ватно-марлевую пробку, следят за тем, чтобы не замочить (не загрязнить) пробку средой и/или собранным материалом. Собранную пробу тщательно перемешивают со средой. Используют также готовые пробирки со специальной плотной средой, разрешенные к применению в установленном порядке;

вирусологических исследований — в специальных емкостях с жидкой средой, разрешенных к применению в установленном порядке;

паразитологических исследований — пробу тщательно смешивают с консервантом.

Пробы ликвора хранят при комнатной температуре (18-20 °С), а при проведении в лаборатории вирусологических исследований — в термостате при 35-37 °С.

4.3. Для трaнcпортирования проб, исследуемых на наличие аэробов и факультативных анаэробов, используют:

одноразовые стерильные сухие пробирки с вмонтированным зондом-тампоном (тубсеры) или емкости с трaнcпортировочной средой, разрешенные к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке; допускается использование стерильных стеклянных пробирок, укупоренных газопроницаемой пробкой с вмонтированным зондом-тампоном, приготовленных в лаборатории;

одноразовые стерильные емкости с завинчивающейся крышкой (допускаются стеклянные с газопроницаемой пробкой) — для сбора проб мочи, мокроты, фекалий, бронхо-альвеолярного лаважа, биопсийного (кусочки ткани) материала;

стерильные одноразовые с завинчивающейся пробкой или стеклянные пробирки — для сбора стерильных жидкостей, бронхо-альвеолярного лаважа, отделяемого из дренажей или соскобов;

стерильные чашки Петри — для сбора проб волос или для трaнcпортирования соскобов с маркировкой дна чашки;

специальные стерильные носоглоточные и урогeнитaльные зонды-тампоны с осью из алюминия (диаметр оси — 0,9 мм) и маленьким тампоном из хлопка или вискозы на кончике (диаметр тампона — 2,5 мм), вмонтированным в пробку, укупоривающую стерильную одноразовую стеклянную пробирку — для проб из носоглотки на В. pertusis и из уретры у мужчин.

4.4. Для трaнcпортирования проб, исследуемых на наличие анаэробов, используют емкости со специальными трaнcпортировочными средами и пробирки с тиогликолевой средой; пробирки со средами для выделения кампилобактерий и хеликобактера, разрешенные к применению для этих целей в Российской Федерации в установленном порядке. Пробу, собранную в жидкую среду, тщательно с ней перемешивают. Для получения проб рекомендуются следующие приемы:

отделяемое дренажей, используемых для активной аспирации полостей, отсасывают стерильным шприцем с плотным поршнем в объеме 2-4 мл; на заполненный шприц надевают стерильную иглу, закрытую стерильным ватным тампоном, удаляют из шприца избыток воздуха; ватный тампон сбрасывают в дезинфицирующий раствор; конец иглы вкалывают в стерильную резиновую пробку и в таком виде шприц с материалом доставляют в лабораторию;

содержимое очагов инфекции и полостей, получаемое путем их пунктирования, собирают в объеме 2-4 мл с помощью 2-, 5-, 10-миллилитровых шприцев с плотным поршнем; из шприца удаляют избыток воздуха, закрыв иглу стерильным ватным тампоном, который затем сбрасывают в дезинфицирующий раствор; иглу дезинфицируют протиранием тампоном, смоченным 70%-м этиловым спиртом; для герметизации конец иглы вкалывают в стерильную резиновую пробку и в таком виде шприц с материалом доставляют в лабораторию.

При сборе большого объема материала (3 мл и более) анаэробные бактерии могут оставаться жизнеспособными в течение 24 ч при комнатной температуре (18-20 °С).

Если отделяемого всего несколько капель, его переносят из шприца в небольшую емкость или в пробирку с трaнcпортировочной средой немедленно после получения (емкости с трaнcпортировочными средами накануне получают в лаборатории).

Кусочки тканей (биопсийный материал) при подозрении на анаэробную инфекцию собирают в стерильные одноразовые емкости с завинчивающейся крышкой (допускается — в стеклянную посуду с притертой крышкой) и доставляют в лабораторию немедленно.

4.5. Для трaнcпортирования проб, исследуемых на наличие вирусов, используют специальные емкости с жидкой средой для сохранения вирусов.

5. Пробы различных видов биоматериала и среды, окружающей больного

Посуда, используемая для доставки проб в лабораторию

Инструкция по сбору биоматериала

К биоматериалам относят мочу, кал, молоко, слюна, cпepма и др.

Анализ мочи

До начала сбора мочи необходимо провести туалет наружных пoлoвых органов:

• у женщин – ватным тампоном теплой водой с мылом промываются пoлoвые губы и вход во влагалище движением спереди-вниз, затем тщательно ополаскиваются теплой водой и высушиваются салфеткой, предварительно проглаженной горячим утюгом.
• у мужчин – теплой водой с мылом проводится туалет наружного отверстия мочеиспускательного канала, затем тщательно ополаскивается теплой водой и высушивается салфеткой, предварительно проглаженной горячим утюгом.

После цистоскопии анализы мочи можно сдавать не ранее чем через 5-7 дней.

Во время мeнcтpуации мочу сдавать нельзя.

Общий (клинический) анализ мочи – используют первую утреннюю порцию мочи (предыдущее мочеиспускание должно быть не позже 2 часов ночи). Собирают всю порцию сразу после сна (натощак) при свободном мочеиспускании. Мужчинам необходимо полностью освободить наружное отверстие мочеиспускательного канала, оттянув кожную складку; женщины должны раздвинуть наружные пoлoвые губы. Первые несколько миллилитров мочи сливают, остальное собирают в специальный контейнер и привозят в лабораторию. Из горшка или судна мочу собирать нельзя.

Хранение мочи допускается при температуре 2-4 градуса С не более 1,5 часов.

Сбор суточной мочи – производится для биохимического анализа мочи, анализа мочи на гормоны. Пациент собирает мочу в течение суток при обычном питьевом режиме (около 1,5 литров в сутки). Первую утреннюю порцию мочи (в 6-8 часов) выливают, остальные порции мочи собирают в чистую емкость (объемом не менее 2л) с крышкой, желательно из темного стекла. Последняя порция мочи собирается точно в то время, когда накануне был начат сбор.

Емкость с мочой желательно хранить в прохладном месте (в холодильнике на нижней полке при температуре 4-8 градусов С), но не допускать замораживания.

После того, как моча собрана, измеряют ее объем , мочу тщательно перемешивают и отливают 50-100 мл в специальный контейнер, в котором доставляют в лабораторию. Обязательно указывают объем суточной мочи.

Сбор мочи для анализа по Нечипоренко – собирают среднюю порцию утренней мочи сразу после сна (натощак) при свободном мочеиспускании. Подготовка к сбору мочи проводится также, как к сбору мочи на общий анализ.

Мочу собирают по методу «трехстаканной» пробы: начинают мочиться в первую емкость, продолжают – во вторую, заканчивают – в третью. Вторая порция должна быть преобладающей по объему; сбор проводят в чистую, сухую, широкогорлую посуду, не касаясь тела краями склянки.

Собранную вторую (среднюю) порцию мочи (20-25 мл) доставляют в лабораторию.

Допускается хранение мочи при температуре2-4 градуса С не более 1,5 часов.

Сбор мочи для анализа по Зимницкому – режим питания пациента остается обычным, но при этом учитывается количество выпитой жидкости за сутки. Утром в 6 часов пациент oпopoжняет мочевой пузырь. После этого через каждые 3 часа собирают мочу в отдельные емкости, на которых указывают номер порции или время сбора. Всего должно быть 8 порций.