Разновидности риккетсиозов: отличительные хаpaктеристики и сходства
Разновидности риккетсиозов: отличительные хаpaктеристики и сходства
Строение и жизнедеятельность риккетсий
Риккетсии являются особенными микроорганизмами, которые сочетают свойства, присущие как бактериям, так и вирусам. Со многими бактериями риккетсии сходны благодаря аналогичному клеточному строению, наличию ферментной активности, кислородному дыханию и чувствительности к антибиотическим веществам, с вирусами – их способностью к жизни и размножению лишь внутри клетки живого организма.
Рис. 1. Риккетсии.
Распространенность риккетсий
В природных условиях риккетсии часто обнаруживают в организме таких члeнистоногих насекомых, как клещи, блохи и вши. В их организмах эти бактерии живут в стенке кишечника, не вызывая болезней. В зависимости от вида насекомого риккетсии делят на группы. В организме человека их выявляют в клетках, которые выстилают поверхность кровеносных сосудов, благодаря чему могут вызывать проблемы их воспаления, закупорки или кровоизлияния.
Рис. 2. Насекомые — переносчики риккетсиозов.
Размер клеток риккетсий
Клетки данных бактерий при наличии оптимальных условий обладают палочковидным строением – в ширину приблизительно 0,2—0,6, а в длину — 0,4—2,0 мкм. То есть, своими размерами данные бактерии напоминают крупные вирусы. Стадия их роста способна влиять на их форму. Если произошла смена условий окружающей среды, возможно образование нитевидных клеток или клеток неправильных форм. Иногда встречается и бактерии в виде кокков.
Рис. 3. Форма риккетсий.
Особенности строения риккетсий
Клетки риккетсий имеют типичное бактериальное строение: поверхностная структура представлена оболочкой, они имеют протоплазму, диффузно расположенный в их цитоплазме ядерный материал, в числе которого выявляют присутствие нуклеоида, рибосом, РНК, а также ДНК. Кроме того, в их нуклеоиде, сходно с другими бактериальными нуклеоидами, нет оболочки и ядрышка.
Как большая часть грамотрицательных бактерий, на внешней стороне риккетсии содержат микрокапсулярный слой размерами от 10 до 15 нм, за ним- трехслойную мембрану размерами от 8 до 12 нм, а также цитоплазму, образованной грануламирибосом.
Рис. 4. Строение бактериальной клетки.
На поверхности риккетсий, вызывающих сыпный тиф и лихорадку цуцугамуши при использовании метода электронной микроскопии обнаружены сходные с бактериальными, волосовидные фимбрии, роль которых в жизнедеятельности риккетсий сегодня не установлена.
Однако в структуре риккетсий есть несколько особенностей, которые отличают их от остальных бактерий.
- На поверхностях их клеточных стенок выявлено наличие капсулоподобного слизистого покрова, а также микрокапсулы, которые содержат группоспецифичные антигены. В структуре стенокклеток этих бактерий обнаружены пептидогликаны, липополисахариды и белки, большая часть которых является видоспецифичными антигенами.
- В составе цитоплазматической мембраны таких бактерий выявлено наличие значительного количества ненасыщенных жирных кислот.
- Для их клеточных стенокхаpaктерны осмотические свойства и трaнcпортная система по типу АТФ-АДФ.
- В составе их нуклеоида- кольцевая хромосома.
- Метаболизм данных бактерий независим от метаболизма хозяина. Главным источником энергетических ресурсов внеклеточных риккетсий является вещество глутамат.
- Бактериальные клетки риккетсий обладают способностью к индукции своего фагоцитоза при помощи эукариотной клетки.
- Риккетсии обладают фактором адгезии, что делает возможным их крепление и колонизацию в организме.
Рис. 5. Микрофотография риккетсии.
Жизненный цикл риккетсий
Риккетсии размножаются при помощи бинарного деления. Исследователи считают, что их размножение во многом происходит благодаря получению ими макроэргических (то есть богатых энергией) соединений от клеток организма хозяина. Жизненный цикл данных видов бактерий включает наличие двух стадий — вегетативной или покоящейся. При вегетативной — бактерия, как правило, представлена формой палочки, делится бинарно и является подвижной. При покоящейся – это сферическая неподвижная клетка, обычно располагающаяся в клетке организма хозяина.
Известно, что размножение риккетсий (за некоторым исключением), наблюдается только при условии, что они находятся внутри живых клеток. Именно поэтому риккетсии, как вирусы, относят к таким внутриклеточным паразитам, способным к процессам роста, а также размножения лишь внутри клетки организма-хозяина. Эти бактерии могут паразитировать в клеточной цитоплазме и в ядре клетки хозяина. Rochalimaeaquintana (возбудитель траншейной лихорадки) является единственным видом, который способен к внеклеточному росту. Поэтому насекомые считаются первичными хозяевами, а также основными переносчиками в жизненном цикле пpaктически всех видов риккетсий.
Рис. 6. Деление клетки.
Устойчивость риккетсий к внешней среде
Риккетсии являются малоустойчивыми к разным условиям окружающей среды: при нагревании до 50°С они погибают уже спустя 10 минут, а до 80°С — спустя 1 минуту. К воздействию низких температур они являются более устойчивыми, что способствует сохранению своей жизнеспособности и вирулентности при температурах от -20 до -80°С целых несколько месяцев.
Клетки риккетсий могут жить лишь в клетках организма, даже в высушенных насекомых или фекалиях их можно обнаружить спустя несколько месяцев, однако при помещении в водный раствор клетки бактерий гибнут уже спустя 2,5—6 часа. Большинство риккетсий являются чувствительными к антибиотическим веществам широкого действия, в особенности к тетрациклиновому ряду.
Чем риккетсии могут быть опасны человеку?
Многие риккетсии патогенны, то есть вызывают заболевания, называемые риккетсиозами. Например, Coxiella, Rickettsia и Rochalimaea. Одни из этих видов способны вызвать тиф, другие лихорадки – например, Ку- или пятнистую, цуцугамуши, а также траншейную.
Заразиться риккетсиозом можно при укусе насекомыми-переносчиками. Существуют еще алиментарный (пищевой) и ингаляционный пути заражения.
Болезни, вызываемые риккетсиями у людей, часто протекают в тяжелой форме и проявляются симптомами лихорадки, которая нередко сопровождается поражениями центральной нервной, а также сердечно сосудистой систем.
Рис. 7. Заражение риккетсиозом через укус клеща.
Диагностика риккетсиозов
Симптомы риккетсиозов на ранних стадиях болезни слабо выражены. Только по прошествии нескольких дней можно заметить увеличение температуры, возникновение сыпи на коже и чувства слабости. Поэтому в диагностике риккетсиозов необходимы лабораторные исследования для выявления данных микроорганизмов при проведении специализированных посевов крови или при анализе образцов ткани. Эти бактерии можно увидеть под микроскопом при проведении специализированного окрашивания их клеток. Помимо этого, для диагностирования можно использовать метод обнаружения антител в крови.
Рис. 8. Диагностика риккетсиозов.
Способы получения вакцины
В связи с тем, что рост пpaктически всех видов риккетсий вне клеток организма хозяина невозможен, то при создании вакцин против заболеваний, вызываемых этими бактериями, в лабораториях исследователи часто применяют их культивирование при использовании куриных эмбрионов, перевиваемых клеточных культур, мышиных легких. Для этого разработаны также специальные методы для заражения насекомых при помощи эпидермомембран, а также методики кормления насекомых кровью сквозь пленки эпидермиса для поддерживания жизнеспособности клеток риккетсий или возможности стимуляции заражения.
Разновидности риккетсиозов: отличительные хаpaктеристики и сходства
Риккетсии по своим размерам находятся на грани видимости в обычный микроскоп (0,5 нм). Это сближает их с бактериями. Неспособность расти на питательных средах в связи с их внутриклеточным паразити-рованием сближает их с вирусами. Риккетсий — полиморфные образования; грамотрицательные, красятся краской по Романовскому-Гимзе.
Большинство видов риккетсий (более 40) обитают у члeнистоногих и не вызывают болезней у млекопитающих. Патогенные риккетсий относятся к отряду Rickettsiales, семейству Rickttsiaceae, которое включает три рода; 1. Ricketsia, 2. Rochalimella, 3. Coxiella. К роду риккетсий относятся почти все возбудители риккетсиозов у человека.
К роду Rochalimella -два вида — возбудитель волынской (окопной) лихорадки (R. quintana) и возбудитель клещевого пароксизмального риккетсиоза (R. rutchkovsky). К рохалимеллам отнесен также недавно выделенный новый вид (R. henselae), который вызывает заболевание со своеобразной клиникой у ВИЧ-инфицированных людей. К роду Coxiella относится только возбудитель лихорадки Ку (Coxiella burnetti). Кроме того, в последние годы обнаружено несколько видов эрлихиелл и зарегистрировано множество вызываемых ими заболеваний человека.
Классификация риккетсий (П.Ф. Здродовский, 1972 г.) постоянно совершенствуется. В частности R. quintana и R. henselae отнесены к бартонеллам, а заболевания, вызываемые ими, стали называться бартонеллезами. Установлена связь коксиелл с легионеллами. В последние годы интенсивно изучаются эрлихиозы.
Общностью для всех риккетсий является близость их антигенной структуры (кроме возбудителя лихорадки Ку), что дает положительные перекрестные серологические реакции с другими риккетсиозными антигенами, но, как правило, в более низких титрах по сравнению с возбудителями болезни. Все патогенные риккетсий поражают мелкие кровеносные сосуды: размножаются внутри их эндотелия, в серозных оболочках, клетках ретикулогистиоцитарной системы с образованием специфических гранулем (универсальный васкулит).
Риккетсий группы сыпного тифа продуцируют специфический эндотоксин белковой природы, тесно связанный с мембраной клетки. При нагревании и при воздействии формалина теряется их токсичность, но сохраняются антигенные свойства. В отличие от вирусов они имеют не одну, а две нуклеиновые кислоты (ДНК и РНК). Риккетсий, как и вирусы, являются облигатными внутриклеточными, а некоторые из них и внутриядерными паразитами. Как бактерии они обладают самостоятельной энергетической активностью; у них обнаружены энзимные системы (глутаматоксидазная система, трaнcаминазы и др.), но в условиях внутриклеточного нахождения их ферменты перестают функционировать.
Риккетсии размножаются путем бинарного деления с сохранением специфической структуры и клеточной целостности особей возбудителя.
Трансмиссивный путь передачи инфекции является общим для всех риккетсиозов, за исключением лихорадки Ку, возбудитель которой, коксиелла Бернета, в связи с устойчивостью во внешней среде может передаваться также воздушно-капельным (аэрогенным), алиментарным и контактным (через кожу) путями. Все риккетсиозные болезни оставляют стойкий иммунитет. Объединяет возбудители риккетсиоза высокая чувствительность к тетрациклинам.
Общая хаpaктеристика патогенных риккетсий
Риккетсиозы — группа заболеваний многих видов животных и человека, вызываемые внутриклеточными паразитами (риккетсиями), которые передаются в основном трaнcмиссивно и проявляются у животных лихорадками, пневмониями, ринитами, aбopтами и послеродовыми эндометритами, а также поражением лимфатической системы и форменных элементов крови.
Риккетсии названы в честь американского микробиолога Говарда Тейлора Риккетса, открывшего в 1909 году возбудителя одного из риккетсиозов — пятнистую лихорадку Скалистых гор и погибшего при его исследовании (1910).
Риккетсии довольно многочисленная группа, представленная патогенными и непатогенными видами. Патогенных видов значительно меньше. В природе риккетсии обитают преимущественно в организме насекомых (вшей, блох, клещей), а также грызунов, диких и сельскохозяйственных животных.
В настоящее время риккетсии классифицируются, согласно Определителя бактерий Берджи (1984; 1994) следующим образом:
Секция 9. Rickettsii et Chlamydii. Риккетсии и xлaмидии.
Порядок I. Rickettsiales.
Сем. Rickettsiaceae Сем. Bartonellaceae Сем. Anaplasmataceae
Род 1 Rickettsia Род 1 Bartonella Род 1 Anaplasma
Род 2 Rochalimaea Род 2 Grahamella Род 2 Aegyptianella
Род 3 Coxiella Род 3 Haemobartonella
Род 4 Ehrlichia Род 4 Eperhytrozoon
Род 6 Neoriсkettsia
Род 7 Wolbachia
Род 8 Rickettsiella
Ниже приведены основные патогенные роды и виды риккетсий:
Род 1 Rickettsia
Вид R.conjunctivae — возбудитель риккетсиозного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота
Вид R. prowacheki — возбудитель эпидемического сыпного тифа
Всего шестнадцать видов
Вид C. burnetii — возбудитель Ку-лихорадки (Ку-риккетсиоза)
Род 4 Ehrlichia
Вид E. canis — возбудитель эрлихиоза собак (эрлихиозного (Rickettsia canis) моноцитоза)
Вид E. phagocytophila — возбудитель эрлихиоза жвачных и всеядных (E. bovis, E. ovis) (эрлихиозного моноцитоза, риккетсиозного моноцитоза)
Вид E. egui — возбудитель эрлихиоза лошадей
Вид E. senetsee — возбудитель лихорадки долины реки Пото- (E. risticii) мак (эрлихиозного колита, моноцитарного эрлихиоза, синдрома диареи лошадей)
Вид C. ruminantium — возбудитель риккетсиозного гидроперикардита (коудриоза, инфекционного гидроперикардита, сердечной водянки крупного и мелкого рогатого скота)
Род 6 Neorikettsia
Вид N. helminthoeca — возбудитель неориккетсиоза (эрлихиоза) собак
Род 7 Wolbachia
Вид W. melophagi
Вид W. persise — возбудители болезней насекомых
Вид W. pipientis
Род 2 Grachamella
Вид G. peromysci — возбудитель болезни грызунов
Вид G. talpae — возбудитель болезни кроликов
Род 1 Anaplasma
Вид A. centrale — возбудитель анаплазмоза крупного рогатого скота
Вид A. marginale
Вид A. ovis — возбудитель анаплазмоза овец и коз
Роз 3 Haemobartonella
Вид H. felis — возбудители заболеваний собак, кошек,
Вид H. muris диких грызунов
Род 4 Eperythrozoon
Вид E. ovis — возбудитель эперитрозооноза овец
Вид E. suis — возбудитель эперитрозооноза свиней
Вид E. wenyonii — возбудитель эперитрозооноза крупного рогатого скота
Согласно 9-го издания (1994) “Определителя бактерий Берджи” в 2-х томах риккетсии также оставлены в группе (секции) 9 “Риккетсии и xлaмидии”, в которой упразднена таксономическая категория “триба”, остальные таксономические категории — семейства, роды и виды — остались без изменений.
В соответствии с родовой, видовой принадлежностью большую часть патогенных риккетсий подразделяют на группы заболеваний: заболевания вызываемые эрлихиями — эрлихиозы, коудриями — коудриозы, неориккетсиями — неориккетсиозы, анаплазмами — анаплазмозы, бартонеллами — бартонеллезы и т.д.
В настоящее время наибольшую актуальность имеют возбудители: Ку-лихорадки — C. burnetti, риккетсиозного кератоконъюнктивита — R. сonjunctivae, анаплазмоза крупного рогатого скота — A. centrale, A. marginalae и анаплазмоза овец и коз A. ovis.
Строение риккетсий аналогично строению прочих бактерий. У риккетсий выделяют оболочку, цитоплазму и зернистые включения. Ядерная структура представлена зернышками (от 1-2 до 4). В клетках выявляют ДНК и РНК.
Риккетсии полиморфны. Все многообразие их форм может быть сведено к четырем основным морфологическим типам (по П.Ф. Здродовскому, 1972), (рис. 1, приложение 1):
Тип а. Кокковидные, монозернистые риккетсии, размер 0,3-1 мкм (чаще 0,5 мкм) в диаметре, это наиболее патогенный тип, типичны для интенсивного размножения возбудителя в клетках (рис 1 а) ;
Тип в. Палочковидные, биполярные (гантелевидные), размер: ширина 0,3 мкм, длина 1-1,5 мкм (также выделяются при активном развитии риккетсиоза) (рис. 1 в).
Тип с. Бациллярные, удлиненные, обычно изогнутой формы, размер: в ширину 0,3-1 мкм, в длину 3-4 мкм (выделяются в начальном периоде болезни, слабовирулентные, часто бизернистые палочки, иногда могут включать по 4 зернышка парно расположенных на полюсах) (рис. 1 с).
Тип d. Нитевидные, полизернистые риккетсии имеют вид длинных причудливо прогнутых нитей, размер: ширина 0,3-1 мкм, длина 10-40 мкм и более; (их выделение также хаpaктерно для начальных стадий инфекции — показатель раннего умеренного риккетсиоза) (рис. 1,d).
Встречаются также очень мелкие до 0,2 мкм, проходящие через бактериальные фильтры и невидимые в обычном световом микроскопе формы, которые являются ранней стадией внутриклеточной репродукции возбудителя болезни.
Риккетсии неподвижны, спор и капсул не образуют.
Риккетсии размножаются как и бактерии простым поперечным делением. Выделяют 2 типа деления:
обычное деление кокковидных а — и в — форм с образованием гомогенных популяций;
размножение дроблением нитевидных d — форм с последующим образованием популяций, состоящих из клеток а — и в — типов.
Риккетсии окрашиваются грамотрицательно.
Кокковидные формы риккетсий окрашиваются по Романовскому-Гимзе и Цилю-Нильсону в красный цвет, палочковидные и нитевидные в красно-гoлyбой (зерна-гранулы красные, цитоплазма между ними гoлyбая), по Здродовскому — в красный цвет (рис. 2, приложение 2).
Окраска по методу Романовского-Гимзе является классической для выявления риккетсий внутри и вне клеток.
Техника окраски по методу Романовского-Гимзе: препараты-мазки, приготовленные из микробной культуры, высушивают на воздухе 24 часа, фиксируют химическим способом и укладывают в чашки Петри на стеклянные палочки мазком вниз. Краску разводят из расчета одна капля на 1 мл дистиллированной воды (рН 6,8-7,0). Препараты окрашивают холодным (в течение 4-24 часов) или горячим способми (под препараты мазки наливают раствор краски подогретой до 90 0С, красят 20 минут. После окрашивания препараты промывают водой, высушивают и микроскопируют.
В случае необходимости окрашенные препараты можно дополнительно дифференцировать слабым раствором 0,5 % лимонной кислоты в результате чего улучшается контрастность окраски риккетсий в отношении общего фона.
Чаще используют холодный метод. При этом цитоплазма риккетсий окрашивается в фиолетовый или гoлyбой цвет, а ядерные гранулы в красный.
Окраска риккетсий по Романовскому-Гимзе даёт хорошие результаты лишь при соблюдении определенных требований (надежная фиксация препарата, хорошее качество краски, требуемая рН воды, достаточно длительная окраска).
Для текущей работы метод мало пригоден, так как требует длительного времени.
Чаще в пpaктике используют методы дифференциальной окраски фуксином и метиленовым синим, это методы окраски по Здродовскому и Маккиавелло. Суть окраски этими методами заключается в том, что риккетсии имеют известную кислотоустойчивость. После окраски препаратов фуксином, их дифференцируют кислотой и докрашивают метиленовым синим. В итоге риккетсии сохраняют окраску фуксина, а тканевые элементы, окрашиваются в контрастный синий или гoлyбой цвет.
Техника окраски по методу П.Ф. Здродовского: данный метод является облегченной модификацией способа Циля-Нильсена (обычный карболовый фуксин Циля — основной фуксин 1 г, фенол 5 г, спирт 10 мл, дистиллированная вода 100 мл) разводят в соотношении 10-15 капель на 10 мл дважды дистиллированной воды или фосфатного буфера при рН 7,4. Препарат, сделанный тонким слоем, высушивают на воздухе и фиксируют над пламенем, окрашивают разведенным фуксином 5 минут. Затем промывают водой, быстро (2-3 сек) дифференцируют погружением в ванночку с кислотой (0,5 % лимонной или 0,15 % уксусной, либо 0,01% соляной и др.), промывают водой и докрашивают 10 секунд 0,5 % водным раствором метиленовой сини, промывают, подсушивают фильтровальной бумагой. Риккетсии окрашиваются в рубиново-красный цвет, клеточные элементы — в гoлyбой (протоплазмы) или синий (ядро) цвет.
Техника окраски по методу Маккиавелло: подсушенный препарат фиксируют пламенем спиртовки, окрашивают через фильтровальную бумагу фуксином (0,25 % щелочной раствор основного фуксина, рН 7,2-7,4) 4 минуты, промывают водой, погружают в 0,25 % раствор лимонной кислоты по 1-3 секунды, окрашивают 0,5 % водным раствором метиленовой сини, промывают, подсушивают фильтровальной бумагой. Риккетсии окрашиваются в красный цвет на синем фоне (рис. 3).
Культуральные и биохимические свойства
Патогенным риккетсиям свойственнен внутриклеточный паразитизм. Риккетсии не культивируются на обычных питательных средах. Их репродуцируют на развивающихся куриных эмбрионах (РКЭ), в культуре клеток или в организме лабораторных животных.
Читать еще: Образовательный порталРиккетсии — аэробы, поглощают О2 и выделяют СО2, образуют гемолизины, активно окисляют глутаминовую кислоту, выделяя углекислый газ, но индифферентны к глюкозе, образуют эндотоксины, сходные в иммунологических реакциях с бактериальными токсинами, но будучи связанными с риккетсиями в окружающую среду не выделяются.
Патогенные риккетсии образуют токсические вещества, играющие важную роль в патогенезе риккетсиозов. От бактериальных токсинов их отличает неотделимость от микробных клеток и их чрезвычайная неустойчивость. Эндотоксины сходны в иммунологических реакциях с бактериальными токсинами, но будучи связаны с риккетсиями, в окружающую среду не выделяются. В то же время они не тождественны эндотоксинам, так как термолабильны (белки) и неустойчивы к действию формалина (при иннактивации сохраняют свои иммуногенные свойства). Всем патогенным видам присущи гемолитические свойства.
Выживаемость в жидких средах зависит от их свойства, рН и ТоС, лучше сохраняются в белковых средах с нейтральной или слабощелочной рН. Так, Coxiella burnetii сохраняется в молоке при 4оС до 2-х месяцев. В высушеном состоянии сохраняются дольше на различных субсиратах (фекалии вшей) до 1 — 3 лет.
Во внешней среде устойчивость риккетсий (кроме C. burnetii) невысокая. Нагревание во влажной среде до 50-60 0С обеспечивает гибель риккетсий через 5-30 мин, при 70 0С — через 1-3 мин. Риккетсии Бернета (возбудитель Ку-лихорадки) выдерживают длительное (30-90 мин) нагревание при 60-63 0С и полностью погибают только при кипячении. Низкие температуры не убивают, а консервируют риккетсий. Консервируются при минус 20-70 0С, в замороженном состоянии длительное время сохраняют жизнеспособность и вирулентные свойства.
При воздействии на риккетсий различных дезосредств в обычных концентрациях (3-5 % фенол, 2 % хлорамин, 2 % формальдегид, 10 % перекись водорода, 10 % гидроокись натрия), их гибель наступает через 5 мин, а 1 % раствор хлорной извести убивает риккетсий через 1 минуту.
Риккетсии чувствительны к тетрациклину, дибиомицину, синтомицину, левомицетину и сульфаниламидам.
Лиофилизация обеспечивает длительное сохранение (годами).
Патогенность риккетсий определяется их способностью проникать в чувствительные к ним клетки, где происходит их размножение, синтезировать токсин, действие которого проявляется лишь при жизни микроорганизмов. Токсин не секретируется как истинные экзотоксины и не вызывает интоксикацию организма после гибели возбудителя, как эндотоксины. Он термолабилен, разрушается при нагревании микробной суспензии до 600С. внутривенное введение взвеси живых риккетсий белым мышам, вызывает острую интоксикацию и cмepть животных через 2-24 часа.
Риккетсиям свойственна изменчивость проявляющаяся снижением и утратой вирулентности с сохранением иммуногенных свойств, что используют при изготовлении живых авирулентных вакцин.
Дифференциация риккетсий от вирусов и прокариотных микроорганизмов
Риккетсии схожи как с вирусами, так и с бактериями, но существует ряд отличительных особенностей.
Сходство с прокариотными микроорганизмами:
риккетсии имеют трехслойную клеточную стенку;
содержат два типа нуклеиновых кислот, рибосомы и систему дыхания сходную с прокариотами;
окрашиваются анилиновыми красителями;
чувствительны к антибиотикам тетрациклинового ряда, сульфаниламидам, а некоторые виды (N. hilminthoeca) к широкому спектру антибиотиков.
Сходство с вирусами:
риккетсии облигатные внутриклеточные паразиты;
самые мелкие формы риккетсий обладают фильтруемостью через бактериальные фильтры;
риккетсии способны культивироваться только в живой клетке (РКЭ, КК, организме лабораторных животных) ;
риккетсии обладают тканевым тропизмом;
для риккетсий хаpaктерно отсутствие строгой хозяиноспецифичности.
рикетсии стимулируют выработку интерферона
Сравнительная хаpaктеристика прокариотных микроорганизмов и вирусов
Разновидности риккетсиозов: отличительные хаpaктеристики и сходства
Риккетсии — Ф. К. Черкес
Риккетсии — это особая группа полиморфных бактерий, которые являются внутриклеточными паразитами. Они включены в семейство Rickettsiaceae.
Первого представителя этой группы выявил в 1909 г. американский ученый Риккетс при изучении этиологии лихорадки Скалистых гор. От этого заболевания он погиб.
В 1913 г. чешский ученый Провацек в крови больных сыпным тифом также обнаружил подобные микроорганизмы. Заразившись сыпным тифом, ученый тоже погиб.
А в 1916 г. португальский ученый Роша-Лима на основании длительных наблюдений установил, что возбудителями мексиканского тифа, европейского сыпного тифа и других подобных заболеваний являются разновидности микроорганизмов, обнаруженных Риккетсом, и в честь первооткрывателя назвал их риккетсиями. А в память Провацека возбудителя сыпного тифа назвал риккетсиями Провацека.
Большой вклад в изучение сыпного тифа внесли А. А. Кронтовский, М. А. Кронтовская, П. Ф. Здродовский, Е. С. Галиневич и др.
Среди риккетсии имеются разновидности, патогенные для человека, животных и члeнистоногих.
У человека риккетсии обусловливают различные лихорадочные заболевания,% называемые риккетсиозами.
По П. Ф. Здродовскому, риккетсиозы человека делятся на 5 групп: группа сыпного тифа, группа клещевых пятнистых лихорадок, группа цуцугамуши, группа Ку-лихорадки, группа пароксизмальных риккетсиозов.
Классификация риккетсиозов основана на ряде признаков: свойств возбудителя, эпидемиологии и клиники заболевания.
На территории СССР встречаются некоторые из риккетсиозов: эпидемический сыпной тиф (европейский), болезнь Брилла, эндемический сыпной тиф, Ку-лихорадка.
Морфология. Риккетсии это мелкие (0,2-1 мкм), полиморфные микроорганизмы, среди которых встречаются палочковидные, кокковидные и нитевидные (длиной 10-30 мкм) представители.
Риккетсии не имеют спор, капсул, неподвижны. Грамотрицательны. По Романовскому — Гимзе и по способу Здродовского окрашиваются в красный цвет. Строение клеточной стенки сходно со строением стенки грамотрицательных бактерий.
Культивирование. Риккетсии размножаются внутри клетки хозяина. Аэробы. Обладают собственным метаболизмом, ведут себя в клетке самостоятельно. Однако являются энергетически зависимыми от клетки паразитами.
В клетке хозяина каждый вид риккетсии размножается только в определенных местах: в цитоплазме, ядре или вакуолях клеток. Они хорошо размножаются в тканях чувствительных к ним животных и члeнистоногих. В лабораторной пpaктике наиболее часто используется метод заражения куриных эмбрионов и культуры тканей.
Ферментативные свойства. Не выражены.
Токсинообразование. Риккетсии образуют термолабильный эндотоксин.
Антигенная структура. Риккетсии имеют два антигена: групповой термостабильный и специфический термолабильный.
Устойчивость к факторам окружающей среды. К высоким температурам риккетсии мало устойчивы. Исключением являются возбудители Ку-лихорадки. К низким температурам и к высушиванию все риккетсии устойчивы. Они чувствительны к антибиотикам. Сульфамиды не ингибируют их роста.
Общая хаpaктеристика патогенных риккетсий
Риккетсиозы — группа заболеваний многих видов животных и человека, вызываемые внутриклеточными паразитами (риккетсиями), которые передаются в основном трaнcмиссивно и проявляются у животных лихорадками, пневмониями, ринитами, aбopтами и послеродовыми эндометритами, а также поражением лимфатической системы и форменных элементов крови.
Риккетсии названы в честь американского микробиолога Говарда Тейлора Риккетса, открывшего в 1909 году возбудителя одного из риккетсиозов — пятнистую лихорадку Скалистых гор и погибшего при его исследовании (1910).
Риккетсии довольно многочисленная группа, представленная патогенными и непатогенными видами. Патогенных видов значительно меньше. В природе риккетсии обитают преимущественно в организме насекомых (вшей, блох, клещей), а также грызунов, диких и сельскохозяйственных животных.
В настоящее время риккетсии классифицируются, согласно Определителя бактерий Берджи (1984; 1994) следующим образом:
Секция 9. Rickettsii et Chlamydii. Риккетсии и xлaмидии.
Порядок I. Rickettsiales.
Сем. Rickettsiaceae Сем. Bartonellaceae Сем. Anaplasmataceae
Род 1 Rickettsia Род 1 Bartonella Род 1 Anaplasma
Род 2 Rochalimaea Род 2 Grahamella Род 2 Aegyptianella
Род 3 Coxiella Род 3 Haemobartonella
Род 4 Ehrlichia Род 4 Eperhytrozoon
Род 6 Neoriсkettsia
Род 7 Wolbachia
Род 8 Rickettsiella
Ниже приведены основные патогенные роды и виды риккетсий:
Род 1 Rickettsia
Вид R.conjunctivae — возбудитель риккетсиозного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота
Вид R. prowacheki — возбудитель эпидемического сыпного тифа
Всего шестнадцать видов
Вид C. burnetii — возбудитель Ку-лихорадки (Ку-риккетсиоза)
Род 4 Ehrlichia
Вид E. canis — возбудитель эрлихиоза собак (эрлихиозного (Rickettsia canis) моноцитоза)
Вид E. phagocytophila — возбудитель эрлихиоза жвачных и всеядных (E. bovis, E. ovis) (эрлихиозного моноцитоза, риккетсиозного моноцитоза)
Вид E. egui — возбудитель эрлихиоза лошадей
Вид E. senetsee — возбудитель лихорадки долины реки Пото- (E. risticii) мак (эрлихиозного колита, моноцитарного эрлихиоза, синдрома диареи лошадей)
Вид C. ruminantium — возбудитель риккетсиозного гидроперикардита (коудриоза, инфекционного гидроперикардита, сердечной водянки крупного и мелкого рогатого скота)
Род 6 Neorikettsia
Вид N. helminthoeca — возбудитель неориккетсиоза (эрлихиоза) собак
Род 7 Wolbachia
Вид W. melophagi
Вид W. persise — возбудители болезней насекомых
Вид W. pipientis
Род 2 Grachamella
Вид G. peromysci — возбудитель болезни грызунов
Вид G. talpae — возбудитель болезни кроликов
Род 1 Anaplasma
Вид A. centrale — возбудитель анаплазмоза крупного рогатого скота
Вид A. marginale
Вид A. ovis — возбудитель анаплазмоза овец и коз
Роз 3 Haemobartonella
Вид H. felis — возбудители заболеваний собак, кошек,
Вид H. muris диких грызунов
Род 4 Eperythrozoon
Вид E. ovis — возбудитель эперитрозооноза овец
Вид E. suis — возбудитель эперитрозооноза свиней
Вид E. wenyonii — возбудитель эперитрозооноза крупного рогатого скота
Согласно 9-го издания (1994) “Определителя бактерий Берджи” в 2-х томах риккетсии также оставлены в группе (секции) 9 “Риккетсии и xлaмидии”, в которой упразднена таксономическая категория “триба”, остальные таксономические категории — семейства, роды и виды — остались без изменений.
Читать еще: Недорогие, но эффективные препараты для лечения грибка ногтейВ соответствии с родовой, видовой принадлежностью большую часть патогенных риккетсий подразделяют на группы заболеваний: заболевания вызываемые эрлихиями — эрлихиозы, коудриями — коудриозы, неориккетсиями — неориккетсиозы, анаплазмами — анаплазмозы, бартонеллами — бартонеллезы и т.д.
В настоящее время наибольшую актуальность имеют возбудители: Ку-лихорадки — C. burnetti, риккетсиозного кератоконъюнктивита — R. сonjunctivae, анаплазмоза крупного рогатого скота — A. centrale, A. marginalae и анаплазмоза овец и коз A. ovis.
Строение риккетсий аналогично строению прочих бактерий. У риккетсий выделяют оболочку, цитоплазму и зернистые включения. Ядерная структура представлена зернышками (от 1-2 до 4). В клетках выявляют ДНК и РНК.
Риккетсии полиморфны. Все многообразие их форм может быть сведено к четырем основным морфологическим типам (по П.Ф. Здродовскому, 1972), (рис. 1, приложение 1):
Тип а. Кокковидные, монозернистые риккетсии, размер 0,3-1 мкм (чаще 0,5 мкм) в диаметре, это наиболее патогенный тип, типичны для интенсивного размножения возбудителя в клетках (рис 1 а) ;
Тип в. Палочковидные, биполярные (гантелевидные), размер: ширина 0,3 мкм, длина 1-1,5 мкм (также выделяются при активном развитии риккетсиоза) (рис. 1 в).
Тип с. Бациллярные, удлиненные, обычно изогнутой формы, размер: в ширину 0,3-1 мкм, в длину 3-4 мкм (выделяются в начальном периоде болезни, слабовирулентные, часто бизернистые палочки, иногда могут включать по 4 зернышка парно расположенных на полюсах) (рис. 1 с).
Тип d. Нитевидные, полизернистые риккетсии имеют вид длинных причудливо прогнутых нитей, размер: ширина 0,3-1 мкм, длина 10-40 мкм и более; (их выделение также хаpaктерно для начальных стадий инфекции — показатель раннего умеренного риккетсиоза) (рис. 1,d).
Встречаются также очень мелкие до 0,2 мкм, проходящие через бактериальные фильтры и невидимые в обычном световом микроскопе формы, которые являются ранней стадией внутриклеточной репродукции возбудителя болезни.
Риккетсии неподвижны, спор и капсул не образуют.
Риккетсии размножаются как и бактерии простым поперечным делением. Выделяют 2 типа деления:
обычное деление кокковидных а — и в — форм с образованием гомогенных популяций;
размножение дроблением нитевидных d — форм с последующим образованием популяций, состоящих из клеток а — и в — типов.
Риккетсии окрашиваются грамотрицательно.
Кокковидные формы риккетсий окрашиваются по Романовскому-Гимзе и Цилю-Нильсону в красный цвет, палочковидные и нитевидные в красно-гoлyбой (зерна-гранулы красные, цитоплазма между ними гoлyбая), по Здродовскому — в красный цвет (рис. 2, приложение 2).
Окраска по методу Романовского-Гимзе является классической для выявления риккетсий внутри и вне клеток.
Техника окраски по методу Романовского-Гимзе: препараты-мазки, приготовленные из микробной культуры, высушивают на воздухе 24 часа, фиксируют химическим способом и укладывают в чашки Петри на стеклянные палочки мазком вниз. Краску разводят из расчета одна капля на 1 мл дистиллированной воды (рН 6,8-7,0). Препараты окрашивают холодным (в течение 4-24 часов) или горячим способми (под препараты мазки наливают раствор краски подогретой до 90 0С, красят 20 минут. После окрашивания препараты промывают водой, высушивают и микроскопируют.
В случае необходимости окрашенные препараты можно дополнительно дифференцировать слабым раствором 0,5 % лимонной кислоты в результате чего улучшается контрастность окраски риккетсий в отношении общего фона.
Чаще используют холодный метод. При этом цитоплазма риккетсий окрашивается в фиолетовый или гoлyбой цвет, а ядерные гранулы в красный.
Окраска риккетсий по Романовскому-Гимзе даёт хорошие результаты лишь при соблюдении определенных требований (надежная фиксация препарата, хорошее качество краски, требуемая рН воды, достаточно длительная окраска).
Для текущей работы метод мало пригоден, так как требует длительного времени.
Чаще в пpaктике используют методы дифференциальной окраски фуксином и метиленовым синим, это методы окраски по Здродовскому и Маккиавелло. Суть окраски этими методами заключается в том, что риккетсии имеют известную кислотоустойчивость. После окраски препаратов фуксином, их дифференцируют кислотой и докрашивают метиленовым синим. В итоге риккетсии сохраняют окраску фуксина, а тканевые элементы, окрашиваются в контрастный синий или гoлyбой цвет.
Техника окраски по методу П.Ф. Здродовского: данный метод является облегченной модификацией способа Циля-Нильсена (обычный карболовый фуксин Циля — основной фуксин 1 г, фенол 5 г, спирт 10 мл, дистиллированная вода 100 мл) разводят в соотношении 10-15 капель на 10 мл дважды дистиллированной воды или фосфатного буфера при рН 7,4. Препарат, сделанный тонким слоем, высушивают на воздухе и фиксируют над пламенем, окрашивают разведенным фуксином 5 минут. Затем промывают водой, быстро (2-3 сек) дифференцируют погружением в ванночку с кислотой (0,5 % лимонной или 0,15 % уксусной, либо 0,01% соляной и др.), промывают водой и докрашивают 10 секунд 0,5 % водным раствором метиленовой сини, промывают, подсушивают фильтровальной бумагой. Риккетсии окрашиваются в рубиново-красный цвет, клеточные элементы — в гoлyбой (протоплазмы) или синий (ядро) цвет.
Техника окраски по методу Маккиавелло: подсушенный препарат фиксируют пламенем спиртовки, окрашивают через фильтровальную бумагу фуксином (0,25 % щелочной раствор основного фуксина, рН 7,2-7,4) 4 минуты, промывают водой, погружают в 0,25 % раствор лимонной кислоты по 1-3 секунды, окрашивают 0,5 % водным раствором метиленовой сини, промывают, подсушивают фильтровальной бумагой. Риккетсии окрашиваются в красный цвет на синем фоне (рис. 3).
Культуральные и биохимические свойства
Патогенным риккетсиям свойственнен внутриклеточный паразитизм. Риккетсии не культивируются на обычных питательных средах. Их репродуцируют на развивающихся куриных эмбрионах (РКЭ), в культуре клеток или в организме лабораторных животных.
Риккетсии — аэробы, поглощают О2 и выделяют СО2, образуют гемолизины, активно окисляют глутаминовую кислоту, выделяя углекислый газ, но индифферентны к глюкозе, образуют эндотоксины, сходные в иммунологических реакциях с бактериальными токсинами, но будучи связанными с риккетсиями в окружающую среду не выделяются.
Патогенные риккетсии образуют токсические вещества, играющие важную роль в патогенезе риккетсиозов. От бактериальных токсинов их отличает неотделимость от микробных клеток и их чрезвычайная неустойчивость. Эндотоксины сходны в иммунологических реакциях с бактериальными токсинами, но будучи связаны с риккетсиями, в окружающую среду не выделяются. В то же время они не тождественны эндотоксинам, так как термолабильны (белки) и неустойчивы к действию формалина (при иннактивации сохраняют свои иммуногенные свойства). Всем патогенным видам присущи гемолитические свойства.
Выживаемость в жидких средах зависит от их свойства, рН и ТоС, лучше сохраняются в белковых средах с нейтральной или слабощелочной рН. Так, Coxiella burnetii сохраняется в молоке при 4оС до 2-х месяцев. В высушеном состоянии сохраняются дольше на различных субсиратах (фекалии вшей) до 1 — 3 лет.
Во внешней среде устойчивость риккетсий (кроме C. burnetii) невысокая. Нагревание во влажной среде до 50-60 0С обеспечивает гибель риккетсий через 5-30 мин, при 70 0С — через 1-3 мин. Риккетсии Бернета (возбудитель Ку-лихорадки) выдерживают длительное (30-90 мин) нагревание при 60-63 0С и полностью погибают только при кипячении. Низкие температуры не убивают, а консервируют риккетсий. Консервируются при минус 20-70 0С, в замороженном состоянии длительное время сохраняют жизнеспособность и вирулентные свойства.
При воздействии на риккетсий различных дезосредств в обычных концентрациях (3-5 % фенол, 2 % хлорамин, 2 % формальдегид, 10 % перекись водорода, 10 % гидроокись натрия), их гибель наступает через 5 мин, а 1 % раствор хлорной извести убивает риккетсий через 1 минуту.
Риккетсии чувствительны к тетрациклину, дибиомицину, синтомицину, левомицетину и сульфаниламидам.
Лиофилизация обеспечивает длительное сохранение (годами).
Патогенность риккетсий определяется их способностью проникать в чувствительные к ним клетки, где происходит их размножение, синтезировать токсин, действие которого проявляется лишь при жизни микроорганизмов. Токсин не секретируется как истинные экзотоксины и не вызывает интоксикацию организма после гибели возбудителя, как эндотоксины. Он термолабилен, разрушается при нагревании микробной суспензии до 600С. внутривенное введение взвеси живых риккетсий белым мышам, вызывает острую интоксикацию и cмepть животных через 2-24 часа.
Риккетсиям свойственна изменчивость проявляющаяся снижением и утратой вирулентности с сохранением иммуногенных свойств, что используют при изготовлении живых авирулентных вакцин.
Дифференциация риккетсий от вирусов и прокариотных микроорганизмов
Риккетсии схожи как с вирусами, так и с бактериями, но существует ряд отличительных особенностей.
Сходство с прокариотными микроорганизмами:
риккетсии имеют трехслойную клеточную стенку;
содержат два типа нуклеиновых кислот, рибосомы и систему дыхания сходную с прокариотами;
окрашиваются анилиновыми красителями;
чувствительны к антибиотикам тетрациклинового ряда, сульфаниламидам, а некоторые виды (N. hilminthoeca) к широкому спектру антибиотиков.
Сходство с вирусами:
риккетсии облигатные внутриклеточные паразиты;
самые мелкие формы риккетсий обладают фильтруемостью через бактериальные фильтры;
риккетсии способны культивироваться только в живой клетке (РКЭ, КК, организме лабораторных животных) ;
риккетсии обладают тканевым тропизмом;
для риккетсий хаpaктерно отсутствие строгой хозяиноспецифичности.
рикетсии стимулируют выработку интерферона
Сравнительная хаpaктеристика прокариотных микроорганизмов и вирусов
Как оказать первую помощь при вывихе сустава? Первая помощь при вывихе Вывих это устойчивое смещение суставных концов костей, в результате чего сустав...
27 06 2024 15:41:32
Эффективные антибактериальные препараты при лимфадените Препараты для лечения воспаления в лимфатических узлах и устранения боли Возникающий лимфаденит...
26 06 2024 7:11:19
AV узловая тахикардия АВ-узловая тахикардия: механизм возникновения, клиника, диагностика и ЭКГ, лечение Все материалы публикуются под авторством, либо...
25 06 2024 21:28:50
Диспластический невус Диспластический невус Диспластический невус – это новообразование, которое относится к группе родимых пигментных пятен (родинок)....
23 06 2024 21:39:16
Беллалгин: препарат от боли и спазмов Беллалгин (Bellalgin) Действующее вещество: Содержание Фармакологическая группа Нозологическая классификация...
21 06 2024 22:39:38
Корень солодки детям от кашля Сироп корня солодки детям от кашля Одним из препаратов для избавления от кашля у ребенка является сироп корня солодки....
20 06 2024 7:29:51
Гликемический индекс овощей: кабачок с высоким ГИ — похудения не жди? Гликемический индекс овощей: кабачок с высоким ГИ — похудения не жди? Сказ про...
18 06 2024 8:21:52
Аналоги Зиртека для детей: что лучше выбрать Зиртек (Зодак, Цетрин) Ответы автора сайта на типичные запросы посетителей страницы: Как долго можно...
17 06 2024 22:55:21
Подсолнечное масло натощак: показания к применению Подсолнечное масло натощак: показания к применению Подсолнечное масло – это тот продукт, который можно...
16 06 2024 16:37:20
Почему болит голова после курения и как с этим бороться? С чем связаны головные боли после курения и как можно с этим бороться? Курение — вредно для...
15 06 2024 11:12:17
Как быстро вывести соли из организма в домашних условиях? Как вывести соль из организма народными средствами и медикаментами быстро Соль присутствует в...
14 06 2024 11:20:33
Лечение бедренного нерва Невропатия бедренного нерва Невропатия бедренного нерва ‒ это заболевание, при котором происходит его поражение по любым...
13 06 2024 21:46:52
Фиброаденома гpyди: симптомы, причины, диагностика и лечение Фиброаденома молочной железы Фиброаденома – доброкачественная опухоль молочной железы с...
11 06 2024 10:18:42
Инструкция по применению Бонафтоновой мази при гepпeсе Мази от гepпeса на теле: список самых эффективных и не дорогих средств Герпес — наиболее...
10 06 2024 3:37:37
Тыква для снижения холестерина: простые рецепты Тыква для снижения холестерина: простые рецепты Оранжевый плод по праву называют «витаминной королевой»...
09 06 2024 11:31:42
Чем полезна скумбрия Скумбрия — польза и вред для организма Покупая рыбу, мы хотим, чтобы она была не только вкусной, но и полезной. Употрeбляя ее в пищу,...
08 06 2024 7:51:36
Аденома желудка: симптомы, лечение Симптоматика тубулярной аденомы в желудке и особенности болезни Опухоли желудка не всегда являются злокачественными. В...
07 06 2024 22:20:34
Амоксициллин при простуде: дозировка для детей и взрослых Амоксициллин при простуде: дозировка для детей и взрослых При лечении простудных заболеваний...
06 06 2024 5:31:11
Как правильно перевязать папиллому ниткой Как удалить папилломы перевязыванием ниткой: поможет ли и чем опасно Папиллома – это доброкачественная опухоль,...
05 06 2024 23:27:51
Комнатный цветок молочай — ядовитый или нет, чем опасен сок Комнатный цветок молочай: чем опасен ядовитый «питомец» Молочай – комнатный цветок, к...
04 06 2024 14:14:38
Клебсиелл пневмонии 10 в 5 степени Klebsiella pneumoniae – что это такое, чем опасна бактерия и как от нее избавиться? Бактериальные посевы позволяют...
03 06 2024 2:42:46
Лечим печень и поджелудочную в домашних условиях Народные средства лечения печени и поджелудочной железы Если печень и поджелудочная железа нуждаются в...
02 06 2024 13:18:18
Опасность подтекания вод при беременности Подтекание околоплодных вод В течение беременности для женского организма хаpaктерны различного рода выделения....
01 06 2024 15:57:19
Что делать, если болит живот при беременности — рекомендации доктора + профилактика болей Что делать, если болит живот при беременности — рекомендации...
31 05 2024 0:29:52
Какой врач лечит поджелудочную железу Какой врач лечит поджелудочную железу Здоровый человек никогда не задается вопросом, какой врач занимается лечением...
30 05 2024 5:59:11
Рецепт самого вкусного апельсинового варенья. Как сварить варенье из апельсинов с кожурой, с имбирем, лимоном, бананом, персиком, ревенем, яблоком, дыней?...
29 05 2024 11:57:40
Как отбелить лицо от веснушек? Салонные и домашние методы осветления Эффективные домашние методы осветления веснушек на лице и теле Веснушки – кому милая...
28 05 2024 0:27:15
Как лечить папилломы у детей и что следует знать в первую очередь? Как лечить папилломы у детей и что следует знать в первую очередь? Любящие родители...
27 05 2024 1:41:44
Пустырник: лечебные свойства и противопоказания Пустырник – лечебные свойства, применение, противопоказания и лечение пустырником Доброго времени суток,...
26 05 2024 11:27:37
Забеременела сразу после замершей беременности Как забеременеть после замершей беременности? В акушерстве под термином «замершая беременность» понимают...
25 05 2024 20:45:13
Опухоли желудка Опухоли желудка Опухоли желудка – полиморфная группа новообразований, поражающих все слои желудка, имеющих различную степень...
24 05 2024 9:42:46
Почему яд Бледной поганки настолько опасен? Отравление бледной поганкой Бледная поганка (зеленый или белый мухомор) – cмepтельно-ядовитый гриб из рода...
23 05 2024 1:38:57
Консервированная фасоль: польза и вред Консервированная фасоль: полезные свойства и вред Употрeбление консервированных продуктов имеет сейчас очень...
22 05 2024 3:48:24
Эффективные лекарственные препараты для лечения аденоидов у детей Эффективные лекарственные препараты для лечения аденоидов у детей Аденоиды представляют...
20 05 2024 7:33:16
Комплекс упражнений с эспандерами на все группы мышц Упражнения с эспандером в домашних условиях для женщин и мужчин Обычные диеты не помогают? Изучите...
19 05 2024 13:38:52
Булочки с корицей Булочки с корицей Булочки с корицей — любимая многими ароматная выпечка. Подробней про булочки с корицей . Вкусные и ароматные булочки....
18 05 2024 1:55:48
Тромбиновое время: проведение анализа, норма у женщин и мужчин Что это за анализ — коагулограмма: норма, расшифровка результатов, как сдавать...
16 05 2024 13:43:47
Герпес у ребенка во рту: первые симптомы заболевания с фото и способы лечения инфекции Как лечить вирус гepпeса во рту у ребенка: фото, симптомы, лечение...
15 05 2024 9:11:46
Овес — как правильно применять продукт для крепкого иммунитета? Советы целительницы Блок Анны Ясюкевич Навигация по записям Напитки с овсом для иммунитета...
14 05 2024 7:20:15
Ихтиоловая мазь при фурункулах: инструкция и рекомендации по применению, секреты и эффективность лечения (отзывы) Ихтиоловая мазь при фурункулах — отзывы,...
13 05 2024 18:34:44
Bionime gm 110 купить тест полоски Тест-полоски БИОНАЙМ (Bionime) Rightest GS 300 - 50 шт Тест-полоски БИОНАЙМ (Bionime) Rightest GS 300 - 50 шт...
12 05 2024 13:41:58
Чесотка у детей — симптомы и лечение Как распознать чесотку у ребенка: первые признаки и последующие симптомы, лечение и профилактика болезни Чесотка...
11 05 2024 19:35:33
Какую обувь лучше носить во время беременности? Обувь при беременности: подбираем правильно Летом, да и теплой осенью так хочется надеть любимые туфли на...
09 05 2024 20:28:10
Еще:
Подробности -1 :: Подробности -2 :: Подробности -3 :: Подробности -4 ::
Показать фото детей пугачевой и галкина
Хождение по мукам: актеры и их роли в сериале 2017 года на канале НТВ
Светлана Колпакова — фото актрисы и личная жизнь, фильмы с ее участием и биография
Серафима Низовская: фильмы и сериалы, личная жизнь и биография, фото из инстаграма актрисы
Пекарь и красавица (сериал, 2019) – актеры и роли в комедии на СТС, дата выхода и описание сюжета серий
Русские семейные саги – список лучших российских сериалов про советское время
Герман томмераас биография личная жизнь
Лучшие русские женские сериалы (список) – рейтинг российских многосерийных фильмов
Жены Артемия Лебедева – Алена Лебедева и личная жизнь с Мариной Литвинович (первая жена)
Оптимисты – сериал на канале Россия 1: актеры и их роли, а также описание сюжета
Жена и бывшие ебари
Дана Абызова – биография молодой актрисы и ее личная жизнь с Алексеем Морозовым
Марина денисова личная жизнь дети фото
Кровавая барыня (сериал, 2018): актеры и роли в фильме, его описание и интересные факты о драме
Рашид Нургалиев — биография знаменитости, личная жизнь, дети
Виктор Хориняк: биография и личная жизнь с женой, фото из инстаграм профиля, популярные роли актера
Томас андерс биография личная жизнь нора
Алексей земсков личная жизнь и биография
Отец Анастасии Заворотнюк умер: причина cмepти мужчины и брата актрисы
Сериал Физрук: актеры и главные роли, дата выхода, популярность и рейтинги
Фильмы с Игорем Петренко в главной роли: список сериалов и кино с его участием, заслуживающих внимания
Никита кузнецов и бывшая жена
Нажуд гучигов бывшая жена
Наталья Терешкова — биография знаменитости, личная жизнь, дети
Куваева юлия актриса личная жизнь
С кем живет юлия бapaновская
Елена аросева биография личная жизнь дети
Роман Прыгунов – биография и личная жизнь режиссера, его фильмы и сериалы
Актриса дарья иванова биография личная жизнь
Иван вырыпаев биография личная жизнь
Анастасия старыгина дочь игоря старыгина биография личная жизнь
Сергeй Угрюмов — фильмы с участием актера и роли в них, его биография и личная жизнь (жена и дети)
Михаил Кремер: биография и подробности личной жизни, главные роли и популярные фильмы
Алена Шишкова — биография знаменитости, личная жизнь, дети
Yanix — биография знаменитости, личная жизнь, дети
Чан ми ран личная жизнь муж дети
Александр карманов жена алиса карманова
Бывшие жены фото в трусиках
Олег аверин биография личная жизнь жена дети фото
Алексей буховцев биография личная жизнь
Ара бабаджанян биография личная жизнь
Эльдар Лебедев – биография и личная жизнь (фото с женой и дети актера), а также фильмы и интересные факты о нем
Дима Масленников — биография знаменитости, личная жизнь, дети
Елена капица актриса личная жизнь
Николай галицкий тесть сергея галицкого
Елена супонина биография личная жизнь
Джонни Синс — биография знаменитости, личная жизнь, дети
Андрей Чубченко (актер) – биография и личная жизнь с женой, фильмы и сериалы с участием артиста
Ксения меньшикова личная жизнь дети
Мэтт бомер и его бывшая жена
Девушка руслана белого
Паршута юлия инь янь
Антон заволокин биография личная жизнь
Бывшая жена япончика фото
Балерина белецкая биография личная жизнь
Норбеков биография личная жизнь
Илья Ильин (актер) – биография и личная жизнь, фильмы с участием артиста
Мария Жиганова (актриса) – биография и личная жизнь, сериалы и фильмы с ее участием
Фарит таишев и его бывшая жена фото
Михаил лучко биография личная жизнь дети
Александрос тсопозидис биография личная жизнь
Алла киреева биография личная жизнь
Елена чухраева жена поташева биография личная жизнь
Юлия латынина личная жизнь дети
Артемий лебедев дети фото
Идеальный враг – сериал на канале Россия: актеры и их роли в нем, а также содержание фильма
Лучшие драмы 2018 – список фильмов: драматические новинки кино (российские и зарубежные)
Глафира стеклова личная жизнь дети
Карина андоленко личная жизнь муж дети фото
Актер владимир васильев бывший муж оксаны михайловой
Адам Шульман — биография знаменитости, личная жизнь, дети
Александр Ширвиндт — биография знаменитости, личная жизнь, дети
Изменила своему мужу с бывшим
Фадис ганиев бывшая жена
Воробьева александра личная жизнь
Чуковский личная жизнь биография
Йен сомерхолдер биография личная жизнь 2017
Сильнейший приворот на бывшего мужа
Бывший муж забрал паспорт
Актриса людмила хитяева биография личная жизнь
Как вернуть уважение бывшего мужа
Может ли бывшая жена прописать своего ребенка
Мужчина скрывает наши отношения от бывшей жены
Красивое признание в любви бывшей жене
Бурджу озберк биография личная жизнь
Как заговорить бывшую жену
Серова биография личная жизнь дети
Ярмольник биография личная жизнь
Может ли бывшая жена отказаться от алиментов на ребенка
Замуж за бывшего мужа свадьба
Бывший муж климовой илья хорошилов
Бывшие жены кобзона фото
Мурат уналмыш личная жизнь биография
Первый муж гузеевой фото илья
К чему снятся бывший муж с новой семьей
Бывшая жена бьет сына
Муж юлии михалковой из пельменей
Биография личная жизнь анатолий смиранин личная жизнь
Личная жизнь лукашенко президент белоруссии
Общаться ли с бывшей любовницей мужа
Ненавидит меня бывший муж
Микаэл арамян личная жизнь фото биография
Если бывшая жена сделала порчу
Бывшая жена у нагиева
Ольга семеновна градская фото
Плаксин александр муж успенской
Юрий богатырев личная жизнь дети
Если снится бывший муж пьяный к чему это
Жена урганта фото наталья и его дети фото
Может ли бывшая жена претендовать на имущество после развода
Имена детей пушкина
Заговоры и молитвы вернуть мужа бывшего
Николай чиндяйкин биография личная жизнь жена дети фото
Биография дмитрия рощина личная жизнь
Мой бывший муж не платит алименты что делать
Валерий леонтьев его семья жена дети
Любовь успенская фото сейчас
Не хочу любить бывшего мужа
Приколы для бывшей жены
Все мужчины лопыревой
Дети пугачевой гарри и лиза
Валентина пудова биография личная жизнь
Личная жизнь актриса валерия заклунная
Вячеслав тихонов биография личная жизнь
Актриса лина шишова личная жизнь
Актриса валюшкина елена личная жизнь фото
Снится бывший муж просит есть
Что значит когда сниться бывшая жена
К чему снится бывший муж держит за руку
Стеклов биография личная жизнь дети
Фото бывшего мужа поклонской
Что говорит бывшая жена меладзе о брежневой
Яна рудковская биография личная жизнь дети
Наталья рычагова биография личная жизнь
Ребенок с бывшем мужем на отдыхе
Актриса качалина биография
Актриса олькина биография личная жизнь
Бывшие жены военнослужащих получают квартиры
Кто бывший муж ксении собчак
Новая соведущая регины тодоренко
Новая жена не пускает к бывшей
Мой муж все время общается с бывшей женой
Орбакайте когда родилась
Кирилл сафонов фото с первой женой
Мать сына сергея лазарева
Бывшая жена курбана омарова
Кто муж марии кожевниковой евгений васильев фото
Кто суррогатная мать детей киркорова
Людмила савельева фото биография личная жизнь семья
Елка певица биография семья дети
Баханкова биография личная жизнь
Снится обнимает бывший муж
Актриса левитина ольга фото
Как узнать как муж относится к бывшей жене
Николай еременко старший личная жизнь
Тимо харди биография личная жизнь
Светлана ходченкова с мужем и детьми фото
Статус о муже бывшему
Безруков и его личная жизнь
Почему мне снится бывшая дeвyшка мужа
Актриса наталья гудкова личная жизнь муж
Халит эргенч и его жена бывшая жена
Lyudmila isakovich дети
Михаил галустян семья дети фото
Нелли уварова актриса личная жизнь
Боссон биография личная жизнь
Наталья доля личная жизнь
Стихи бывшей жене о расставании
Брежнева вера возраст реальный
Кто мать детей филиппа киркорова фото
Убить бывшую любовницу мужа
Мой бывший муж подал в суд на жену
Федор добронравов семья фото жена дети
Мать маши мироновой
Актер андрей соколов биография личная жизнь жены дети
Мария куликова с новым бойфрендом
Почему я завидую бывшей жене мужа
Выписать из муниципальной квартиры бывшую жену без согласия
Валентина матвиенко биография личная жизнь дети фото биография
Муж изменял своей бывшей
Обращение в стихах к бывшему мужу
Второй муж и дети от бывшей жены
Александр невский биография личная жизнь
Бывший муж ломится в дверь что делать
Приснились родители бывшей жены
Настя ивлева инстаграм фото
Алмaзoв актер биография личная жизнь
Актер владлен бирюков биография личная жизнь
Жена урганта карина авдеева
Вы бы вернулись к бывшему мужу
Муж валентины олексенко
Артист бурляев биография личная жизнь
Если нравится друг мужа и он мой бывший
Чадовы биография личная жизнь
Юля михалкова уральские пельмени личная
Тимофей носик биография личная жизнь дети
Бывший муж носит обручальное кольцо
Братья чадовы биография личная жизнь возраст фото
Сергeй светлаков развелся со второй женой
Группа фабрика ирина тонева биография личная жизнь
Муж переписывается со своей бывшей
Хрущев биография личная жизнь
Жена пономаренко бывшего мэра
Юлия снигирь личная жизнь муж дети
Сонник если снится бывшая жена мужа
Дети петра порошенко
Может ли бывшая жена изменить фамилию ребенка
Бывшая жена пирата карибского моря
Как отпустить бывшего мужа психология
Личная жизнь зельдина дети
Жена артемия лебедева фото
Борис галкин биография личная жизнь
Бывший муж ларисы гузеевой
Андрей феськов личная жизнь жена дети
Второй муж орбакайте руслан
Нетребко и ее муж новый
Фото актер илья древнов
Личная жизнь турецкой актрисы тубы
Наталья рогожкина бывшая жена
Бывший муж целует в губы
Жена рэпера джигана оксана самойлова
Кино сериал бывшая жена
Дочь от первого бpaка сергея жукова
Свадебный танец нюши
Куравлев дети фото личная жизнь
Не могу наладить контакт с бывшим мужем
Приснился бывший муж что это означает
Бывший муж ворует ребенка
Стас михайлов биография личная жизнь жена дети фото
Майкл из время покажет
Биография актер воробьев алексей
Могу ли я не давать сына бывшему мужу
Сколько лет матвиенко валентине в 2017 году
Выписать бывшего мужа без его согласия
Дом константина эрнста
Юрий батурин актер и его жена ирина батурина дети фото
Кто пишет песни для нюши
Виталий соломин биография личная жизнь дети фото
Как зовут сына лукашенко
Бывший муж кристины асмус фото
Инна михайлова инстаграм фото
Подкопаева и ее бывший муж
Ефремов олег и его дети фото
Муpaками биография личная жизнь
Елена антипенко бывшая жена антипенко
Виталий синицын биография личная жизнь
Приснился бывший муж обнаженный
Маша гoлyбкина личная жизнь
Бывшая жена повторно подала на алименты
Вера брежнева история жизни
Анна невская личная жизнь муж дети фото
Биография и личная жизнь татьяна арнтгольц
Актриса олеся власова личная жизнь
Можно ли полюбить бывшую жену
Мария захарова фото откровенное
Константин львович эрнст мать
Ножкин михаил иванович личная жизнь дети
Бывшая жена кирилла сафонова елена сафонова фото
Мой муж помогает бывшей теще
Биография и личная жизнь актера павла трубинера
К чему снится бывший покойный муж живым
Родители михаила ефремова
Наталья терехова актриса личная жизнь дети
Сонник к чему снится бывшая жена парня
Меня не навидит бывший муж
Дочери жукова ге opгия константиновича сейчас
Олег ефремов и его женщины
Мисс кэти биография личная жизнь
Сон бывший муж молчит
Телеведущий шейнин
Барыкин биография личная жизнь
Биография ларисы гузеевой личная жизнь
Отвечает ли жена по долгам бывшего
Светлана лобода биография личная жизнь дети фото
Инна елисеева бывшая жена гафта фото
Александра урсуляк биография личная жизнь муж дети
Биография чубайса личная жизнь
Голуб ее бывший муж
Актриса аронова мария личная жизнь
Ильи хорошилова мужа климовой
Фото жена сергея бодрова младшего светлана фото
Биография жены бывшего мэра москвы лужкова
Алименты на содержание бывшей жены до 3 лет судебная пpaктика
Если бывшая жена не дает видеться с ребенком бабушке
Роман курцын личная жизнь жена фото
Дочь вивьен ли биография личная жизнь
Дети пушкина и гончаровой их судьба краткое содержание
Евгений гор муж бабкиной